请教SD大鼠MSCs的培养 - 间充质干细胞专区干细胞之家



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查看: 30378\|回复: 13	go 请教SD大鼠MSCs的培养 [复制链接]

helen841102

新手上路

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楼主

发表于 2010-1-30 12:01 |只看该作者 |正序浏览 |打印

SD大鼠的骨髓间充质干细胞的培养应该用什么培养基呢？我看文献有的用DMEM,还有MEM,还有DMEM/F12的，到底用哪种培养基比较好呢？血清的浓度时10%还是15%呢？还有就是消化的时候是消化的时间比较长的如10分钟或更长的是MSCs,还是消化的时间短的如1-2分钟的是MSCs呢？很困惑，望高人指点。

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14楼

发表于 2010-3-30 00:45 |只看该作者

15%吧

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可怜的孩子

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13楼

发表于 2010-3-26 19:00 |只看该作者

我们用低糖，10%血清DMEM就可以，细胞长的很好。至于血清，我们用的国产四季青血清也很好，甚至有时ES细胞用这种血清维持培养一段时间，效果也不错，出于好奇，专门试验过。其实，培养皿的质量对细胞的粘附增殖影响也很大的，DMEM的来源，都是一些重要的因素。至于胰酶消化，我习惯用0.1%左右的浓度，37度，消化时间与细胞类型及状态有关，镜下观察，至可吹掉状态，终止消化即可。

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illidancui

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12楼

发表于 2010-3-25 21:00 |只看该作者

请问一下是不是高糖和低糖的区别就在于高糖可能会导致msc分化呢？

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helen841102

新手上路

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11楼

发表于 2010-3-23 17:04 |只看该作者

谢谢

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franklinhg

版主

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金话筒优秀版主帅哥研究员博览群书

10楼

发表于 2010-3-17 18:40 |只看该作者

培养基一般都是低糖的血清最好是进口的毕竟国产的血清还是有差距的血清浓度一般都是5%-10% 浓度太高容易分化消化时间其实没有准确的定量因为胰酶的质量培养基内血清的残存量消化的温度等等对这个时间都有影响
个人意见是以无菌的生理盐水先润洗待消化的细胞然后加入预热到37度的胰酶镜下观察细胞开始皱缩就终止然后吹打成均一悬液进行后续操作