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IPS细胞的获取方面的问题? [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2010-3-1 10:40 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
现在我开始准备着手做这方面的课题,但遇到以下问题:1.在做诱导人的体细胞向IPS细胞转化时,为何要用到MEF细胞,这好像是鼠源性的啊2 l" y1 l! f2 L- \# d% ~
2.在做四种逆转录病毒因子转染时,一定要有用逆转录病毒转染培养基吗?这种逆转录病毒培养基可以买到吗?
* M! F7 b' b% B& e7 @& ^% ]2 Q* _最后,想认识一位正在做向ips细胞诱导转化的朋友,我的QQ号是158040891!
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沙发
发表于 2010-3-4 00:10 |只看该作者
简单的说:1.因为MEFs可以分泌一些维持hESCs生长所必须的因子- x+ {0 w9 Y3 d/ K1 c1 `
2.不是很清楚你说的逆转录病毒转染培养基是什么意思,是病毒毒液还是培养基呢?
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藤椅
发表于 2010-3-4 12:57 |只看该作者
那个MEFC是不是要经过什么特殊处理呢?
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板凳
发表于 2010-3-4 19:36 |只看该作者
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回复 3# ahfjwangrui
) I. k: I/ J8 u# s, f2 H& g2 a. C8 ?+ P6 z' f
得用放射性元素照射后让其停止生长后才能用的
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报纸
发表于 2010-3-4 20:24 |只看该作者
回复 3# ahfjwangrui
# T) J+ b$ R* \4 h& z
) m# ]- R) p( ?5 e* O或者是用丝裂霉素处理,总之是使其不再增殖
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地板
发表于 2010-3-5 14:32 |只看该作者
兄弟,能否发一个相关的protocol给我看看!谢谢

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金话筒 优秀会员

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发表于 2010-3-5 15:53 |只看该作者
搜索啊 ,饲养层  制备 。  一大堆的  资料 。 本论坛 也很多 。
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发表于 2010-3-5 20:34 |只看该作者
回复 6# ahfjwangrui
, g/ C( S2 y# J
* m% f* f* k! n5 b( E) B8 |这个你很容易就会搜到的啊,制备滋养层细胞是做干细胞最基本的东西
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金话筒 优秀会员

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发表于 2010-3-7 00:08 |只看该作者
逆转录病毒转染培养基,我没理解错的话,你说的就是把逆转录病毒添加到IPS的常规培养基里所形成的。
. A. j/ ?  o. {! O1 \2 l至于饲养细胞,你有人源的当然更好,问题是你有么?总不能去弄人胚吧,鼠源的也能用了,一些生长因子差不多。5 R8 }& V/ t4 Z$ [
我也准备弄这个呢,多多交流~

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发表于 2010-3-7 00:08 |只看该作者
逆转录病毒转染培养基,我没理解错的话,你说的就是把逆转录病毒添加到IPS的常规培养基里所形成的。3 F4 v/ m% X* x6 \
至于饲养细胞,你有人源的当然更好,问题是你有么?总不能去弄人胚吧,鼠源的也能用了,一些生长因子差不多。4 O1 N; @" c1 Z  [- E3 h5 v4 R: }
我也准备弄这个呢,多多交流~
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