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[请教] 有关细胞收获以后的活率 [复制链接]

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包包
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金话筒 优秀会员 帅哥研究员 小小研究员

楼主
发表于 2018-5-18 10:40 |只看该作者 |正序浏览 |打印
本帖最后由 baby00000003 于 2018-5-18 10:43 编辑 * j' d# j6 x( e  B) A- ~, u
9 K, g0 E- H8 v
RT,7 _# S' L4 S" V9 k6 W

1 ~0 D7 L3 }  m新收获的人源脐带MSC,P5,按照相同的工艺和操作收获以后,用台盼蓝染色测活率,偶尔95%+,偶尔只有80%左右,请教论坛里的各位大神,可能的原因??
& d/ A* n  ]' o7 D9 X5 l" [% X  s大致的操作如下:
0 l* m7 r% z1 Q- o+ V7 m冻存的P4融化,大约8000/cm2培养至90%融合,
) q7 w* f1 \, Z) M8 G$ [' i9 k) P倒掉培养基,0.9%NaCl洗一次# l2 J2 B' R3 i
加trypLE消化,吹打过滤
' U; {2 |. \) G. X; L2 P0 j取样计活率' \( M9 |% n; _! S

- I) m/ `. [8 T) n: }这里面P4的冻存细胞是同一批,操作人都是熟练工,试剂批号短时间内也没更换过,
* u6 J& j: F- j3 T: H即使同一批接种的细胞,分上下午收获也有比较明显的活率差异,所以苦苦百思不解 5 S; S4 N( x4 t5 y. P9 _1 B+ U* ?
/ M1 t* b$ o+ k* J5 \, j; T* E
目前看出的规律是:总体活率不高的时候,细胞悬液里会有被DNA缠住的细胞结团,这样的细胞团里大多是死细胞,至于为什么会产生这样的死细胞,还是想不清楚

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地板
发表于 2018-7-30 13:33 |只看该作者
不同厂家培养基培养出来的干细胞对胰酶消化作用不同

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报纸
发表于 2018-6-3 12:09 |只看该作者
本身台盼蓝测活率也是有差异的,但是两次差别那么大只能是消化过度的原因,至于本身活率不高应该是冻存过程的问题,一定要梯度降温

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板凳
发表于 2018-5-22 11:14 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
也可能细胞有污染

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藤椅
发表于 2018-5-22 09:20 |只看该作者
有可能消化过度的问题,一般培养收集的干细胞活率很高的

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沙发
发表于 2018-5-18 10:53 |只看该作者
新收获的细胞不太可能低95%啊
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