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本帖最后由 baby00000003 于 2018-5-18 10:43 编辑 * j' d# j6 x( e B) A- ~, u
9 K, g0 E- H8 v
RT,7 _# S' L4 S" V9 k6 W
1 ~0 D7 L3 } m新收获的人源脐带MSC,P5,按照相同的工艺和操作收获以后,用台盼蓝染色测活率,偶尔95%+,偶尔只有80%左右,请教论坛里的各位大神,可能的原因??
& d/ A* n ]' o7 D9 X5 l" [% X s大致的操作如下:
0 l* m7 r% z1 Q- o+ V7 m冻存的P4融化,大约8000/cm2培养至90%融合,
) q7 w* f1 \, Z) M8 G$ [' i9 k) P倒掉培养基,0.9%NaCl洗一次# l2 J2 B' R3 i
加trypLE消化,吹打过滤
' U; {2 |. \) G. X; L2 P0 j取样计活率' \( M9 |% n; _! S
- I) m/ `. [8 T) n: }这里面P4的冻存细胞是同一批,操作人都是熟练工,试剂批号短时间内也没更换过,
* u6 J& j: F- j3 T: H即使同一批接种的细胞,分上下午收获也有比较明显的活率差异,所以苦苦百思不解 5 S; S4 N( x4 t5 y. P9 _1 B+ U* ?
/ M1 t* b$ o+ k* J5 \, j; T* E
目前看出的规律是:总体活率不高的时候,细胞悬液里会有被DNA缠住的细胞结团,这样的细胞团里大多是死细胞,至于为什么会产生这样的死细胞,还是想不清楚 |
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