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[请教] 有关细胞收获以后的活率 [复制链接]

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发表于 2018-5-18 10:40 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
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本帖最后由 baby00000003 于 2018-5-18 10:43 编辑 1 L) A9 ^/ ?5 r, W: e3 g8 E

7 h0 V2 a: n2 \* k2 R* f# `RT,; Q& }: `1 F, I- G1 E( X' k
6 G7 [+ C# f$ E/ ~7 c4 P# h* K1 g
新收获的人源脐带MSC,P5,按照相同的工艺和操作收获以后,用台盼蓝染色测活率,偶尔95%+,偶尔只有80%左右,请教论坛里的各位大神,可能的原因??7 D; f. a* {& {: I9 H
大致的操作如下:: d! l/ u: h0 h) A  t
冻存的P4融化,大约8000/cm2培养至90%融合,
9 d" [: f' h- i* B$ Q倒掉培养基,0.9%NaCl洗一次6 ?$ `# Y% p- _7 t
加trypLE消化,吹打过滤) V) Q' [+ @; \# }2 m; P
取样计活率1 k, P" ]2 f9 _5 O. w8 W9 U) b

# o% c2 r5 l2 }0 f: N! ^# y. t9 e这里面P4的冻存细胞是同一批,操作人都是熟练工,试剂批号短时间内也没更换过,* B' b6 T/ v8 ~4 C
即使同一批接种的细胞,分上下午收获也有比较明显的活率差异,所以苦苦百思不解 . z* s1 u5 a6 W  M
' v' x4 q7 v; K- d0 R& a
目前看出的规律是:总体活率不高的时候,细胞悬液里会有被DNA缠住的细胞结团,这样的细胞团里大多是死细胞,至于为什么会产生这样的死细胞,还是想不清楚
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