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本帖最后由 baby00000003 于 2018-5-18 10:43 编辑 6 I4 B# t3 I# S% g
; V; r+ Y9 P$ K7 |' T/ u9 U. xRT，
0 `/ o5 G3 P6 |: @9 N% Z$ {9 X8 @" S* e% |0 x' {
新收获的人源脐带MSC，P5，按照相同的工艺和操作收获以后，用台盼蓝染色测活率，偶尔95%+，偶尔只有80%左右，请教论坛里的各位大神，可能的原因？？% p! ~( S( @" p$ C, h6 o5 @3 M, e
大致的操作如下：- I' a5 T* {* q t
冻存的P4融化，大约8000/cm2培养至90%融合，; [' o7 F" @" G1 B
倒掉培养基，0.9%NaCl洗一次/ I* [' Y5 d$ h* \6 X
加trypLE消化，吹打过滤
6 {. j- u+ q) H( ]取样计活率
* U. C& F5 U$ `) P' d6 P4 V3 [1 C1 ^: @* p4 c) w
这里面P4的冻存细胞是同一批，操作人都是熟练工，试剂批号短时间内也没更换过，
7 J5 e; k* m8 ]. G即使同一批接种的细胞，分上下午收获也有比较明显的活率差异，所以苦苦百思不解
! T/ Y- |* {: Q: y {+ E1 T& ^1 w1 w3 [2 X6 U7 N& x2 i& S
目前看出的规律是：总体活率不高的时候，细胞悬液里会有被DNA缠住的细胞结团，这样的细胞团里大多是死细胞，至于为什么会产生这样的死细胞，还是想不清楚 |
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发表于 2018-5-18 10:40
