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本帖最后由 baby00000003 于 2018-5-18 10:43 编辑
# C& v+ J! T* [ y4 r$ m9 W. x% X3 {) D- U1 [1 y/ v
RT，
/ y" v0 r. p# ~' c* V/ e( j; v" r9 I o/ P; d" R$ N! [, k6 T
新收获的人源脐带MSC，P5，按照相同的工艺和操作收获以后，用台盼蓝染色测活率，偶尔95%+，偶尔只有80%左右，请教论坛里的各位大神，可能的原因？？( n" k* c4 w5 P$ n6 P# Z
大致的操作如下：- t( I; c. M* ]9 S/ e6 C
冻存的P4融化，大约8000/cm2培养至90%融合，# j- y6 c T4 z- g" o
倒掉培养基，0.9%NaCl洗一次: d5 L o' Z% o$ f& ]' s7 Q
加trypLE消化，吹打过滤
7 [; A# m& Z) }! S取样计活率4 }, |6 K. c, X. ^
9 [! y7 Y1 e' `9 R
这里面P4的冻存细胞是同一批，操作人都是熟练工，试剂批号短时间内也没更换过，) t2 D5 [2 L* r( V
即使同一批接种的细胞，分上下午收获也有比较明显的活率差异，所以苦苦百思不解
! ?5 w( C* w; K6 W( |, g# L: N/ ^! K$ j
目前看出的规律是：总体活率不高的时候，细胞悬液里会有被DNA缠住的细胞结团，这样的细胞团里大多是死细胞，至于为什么会产生这样的死细胞，还是想不清楚 |
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发表于 2018-5-18 10:40
