请问Hela细胞该如何养呢

笨鑫

hela细胞该如何养呢？动物细胞和昆虫细胞培养时有那些不同呢？% {6 v( X+ }- J# t3 V4 }: |
       我刚开始培养细胞。, j* V0 y/ b$ I
       谢谢大家！

小鲁鲁

HELA细胞虽然用的多，倒不是很好养，主要是贴壁不紧，换液的时候容易脱落。; _% I- P& W' E  Z! o
昆虫的细胞系，我只养过一种，是半悬浮的，很雷人也很累人……
! B( P. m9 R" f" n3 k+ P至于区别，要看是什么动物的了，培养条件上会有一些差异，不过摸清楚了细胞的特性，不会很难养的。细胞系比干细胞好养多了。慢慢来，加油学习就行了！

shihuijunm

hela细胞的培养条件为:# Y& s8 k/ l: j3 V! Z# H+ P; }* }
高糖DMEM培养基,100ml/l胎牛血清;（培养液DMEM培养基，含10% FCS，100U /ml青霉素及100μg/ml链霉素，于37℃，5%CO2孵箱内培养）下生长就很好,详细可以参照司徒镇强主编的《细胞培养》。
, o& Q/ k) ?& ?" m传代步骤: 1．倒去细胞培养液(对于小口的培养瓶可采用顷倒方法,对于培养皿,必须用吸管吸出) " l2 x5 m! v& N" [2 ^
2．吸取适量的PBS加入培养瓶中,轻轻振荡后弃去重复一次,以清于血清成分,
8 j* C& Z* L, v- ^$ l% w利于胰酶消化9 I! ^: o4 x4 c. ^
3．加入适量0.25%胰蛋白酶（一般100mm培养皿可加入1ml，15cm培养瓶加入5-8滴）转动培养瓶，使其湿润整个细胞房，高温下消化2-3分钟。
: T: ~" S7 G) M翻转培养瓶，肉眼观察细胞单层，见细胞单层薄膜出现针孔大小空隙时即可顷去消化液，如消化程度不够可延长消化时间，或置于37°C孵箱中加速胰酶作用如见大量细胞片装脱落，已消化过头，则不能顷倒消化液而直接进行下一步操作
3 ?. E5 V# \4 o& Q! u9 M9 s7 K4．加入适量培养液终止消化
8 Y" a' L; n  F" I& ?' g8 `; `4 R吸取瓶中培养液反复冲瓶壁上的细胞层，至全部冲下轻轻吹打，混匀，成细胞悬液取样计数，调整细胞浓度为5′10 /ml $ U: j' n+ B" O- b0 y+ a, k
15cm培养瓶培养时，吸取1ml细胞悬液加到新培养瓶中，加入4ml培养液，盖好,置37°C孵箱中培养。
( G) b" t2 p& q! M) a; z传代的天数要以HELA细胞的生长密度为基础,细胞密度大了就要传,应该每天观察HELA细胞,注意其生长状态.HELA细胞的生长分5期:
5 o, J2 S' {0 X  n/ \游离期4 T! G/ m, l. U  O: D5 \
细胞经消化分散后，由于愿生质收缩及细胞弹性，细胞成圆形，折光性强，呈悬浮状态。
8 y9 |& ^! U/ N4 |& H吸附期
# f% B% q- u$ b2 u# _! \接种24小时后，由于细胞的附壁特性，开始贴壁，圆形细胞变成延展状态。; H+ j' z5 N- E0 G) V0 E* d" d& J
繁殖期
% w$ d: ~' X3 c! o# N  A* K细胞快速生长、分裂，形成细胞岛直至细胞单层。
! k1 S1 }; b  w# W' c8 Z4 i维持期2 d2 w3 @! @# r. |3 d5 t9 I! D5 N
细胞形成单层后生长与分裂减缓、折光性减弱，细胞内颗粒增多，由于代谢物的积累，CO2增多，培养液变黄。
9 i+ V' s2 L( p- s1 B0 J# B1 U( O衰退期& {! A2 v4 E  A
如不及时换液和传代，由于营养缺乏、代谢物积累，细胞内颗粒进一步增多,立体感差，细胞皱缩、脱落、逐渐衰老死亡。/ j6 w4 k1 w: S$ j2 c5 z- {- H! p7 t
应该在其维持期和衰退期及时换液.一般而言是4天换一次液.

crystal

写得很好，我也正好要开始养了，帮助很大哟！