请问Hela细胞该如何养呢

笨鑫

hela细胞该如何养呢？动物细胞和昆虫细胞培养时有那些不同呢？
2 `' }+ n, ?; ^: m, ^& Q, D3 s* {       我刚开始培养细胞。. m# S9 T7 c( n# ?: o
       谢谢大家！

小鲁鲁

HELA细胞虽然用的多，倒不是很好养，主要是贴壁不紧，换液的时候容易脱落。: y! I8 g# [* k2 R: B
昆虫的细胞系，我只养过一种，是半悬浮的，很雷人也很累人……; n6 c# B2 _/ M7 [$ r8 A( ^
至于区别，要看是什么动物的了，培养条件上会有一些差异，不过摸清楚了细胞的特性，不会很难养的。细胞系比干细胞好养多了。慢慢来，加油学习就行了！

shihuijunm

hela细胞的培养条件为:
- \) ~0 P4 N: O3 L+ t高糖DMEM培养基,100ml/l胎牛血清;（培养液DMEM培养基，含10% FCS，100U /ml青霉素及100μg/ml链霉素，于37℃，5%CO2孵箱内培养）下生长就很好,详细可以参照司徒镇强主编的《细胞培养》。
* N$ w5 p+ K9 g% k+ h  G7 P8 P传代步骤: 1．倒去细胞培养液(对于小口的培养瓶可采用顷倒方法,对于培养皿,必须用吸管吸出)
4 p+ z; A+ v7 {2．吸取适量的PBS加入培养瓶中,轻轻振荡后弃去重复一次,以清于血清成分,) j. t& S- i$ ~9 J+ o' w' d7 k# m  Z
利于胰酶消化
& p  v1 m6 O' x' C3．加入适量0.25%胰蛋白酶（一般100mm培养皿可加入1ml，15cm培养瓶加入5-8滴）转动培养瓶，使其湿润整个细胞房，高温下消化2-3分钟。5 t/ i6 b1 W( |! I- j
翻转培养瓶，肉眼观察细胞单层，见细胞单层薄膜出现针孔大小空隙时即可顷去消化液，如消化程度不够可延长消化时间，或置于37°C孵箱中加速胰酶作用如见大量细胞片装脱落，已消化过头，则不能顷倒消化液而直接进行下一步操作
& b4 l+ c$ ~- ?2 y' y: \4．加入适量培养液终止消化
1 W  J5 n. p: F) R吸取瓶中培养液反复冲瓶壁上的细胞层，至全部冲下轻轻吹打，混匀，成细胞悬液取样计数，调整细胞浓度为5′10 /ml
; s, x. a- ?3 ]: ?; U' |+ {15cm培养瓶培养时，吸取1ml细胞悬液加到新培养瓶中，加入4ml培养液，盖好,置37°C孵箱中培养。
7 X9 _  e9 s+ d, k& y% I传代的天数要以HELA细胞的生长密度为基础,细胞密度大了就要传,应该每天观察HELA细胞,注意其生长状态.HELA细胞的生长分5期:" |: ^+ Z# G& J/ r9 ~" \% K% _( D/ W
游离期( h, R1 d6 h  ?$ |
细胞经消化分散后，由于愿生质收缩及细胞弹性，细胞成圆形，折光性强，呈悬浮状态。
$ @8 b# m  I' A% O/ c( P吸附期
6 E  n$ h, D( N' Q接种24小时后，由于细胞的附壁特性，开始贴壁，圆形细胞变成延展状态。
+ M% Q9 Y" h" P( y, Y: N; u繁殖期7 d! u0 E7 V$ K  h1 Z
细胞快速生长、分裂，形成细胞岛直至细胞单层。
. c$ X; E) w9 W' V; w0 y3 {维持期: R4 W# Z+ P# a5 ?5 k) ~' p, C
细胞形成单层后生长与分裂减缓、折光性减弱，细胞内颗粒增多，由于代谢物的积累，CO2增多，培养液变黄。
* l! l0 B0 d6 U3 h4 C衰退期
4 w5 @. g$ ]/ d: V8 w; W1 }  W如不及时换液和传代，由于营养缺乏、代谢物积累，细胞内颗粒进一步增多,立体感差，细胞皱缩、脱落、逐渐衰老死亡。% r2 o) Z. U8 l; Y% O
应该在其维持期和衰退期及时换液.一般而言是4天换一次液.

crystal

写得很好，我也正好要开始养了，帮助很大哟！