PGC的培养 补充中

ellapan

欢迎加入讨论,如果你做PGC的培养,请注意她的时间段,小鼠是胚胎期E13.5以前称PGC,人胚胎期E5-9week称PGC,此后停留在G1/G0的Mitosis arrest期,直到出生后才开始恢复有丝分裂
) Y; b7 F7 J8 C5 r
+ z- E1 B7 h8 r/ w4 k& W+ T- M0 E如果你刚接触,我推荐你看看下面的文章
( ^% ~% N( p2 ^5 _) n4 b1992 long-term proliferation of mouse primordial germ cells in culture
: x5 f! N& e' j' i, v" ?# @4 g6 z1993 Proliferation of Mouse Primordial Germ Cells in Vitro A Key Role for cAMP
- p0 U1 i! s" B% U1994 Role of leukemia inhibitory factor and its receptor in mouse primordial germ cell growth* {1 P% P! K6 }; A( }
1995 Purification of Mouse Primordial Germ Cells by MiniMACS Magnetic Separation System
7 F2 f' L% `" _! s0 N3 {: a- S( R* K1995 Retinoic Acid Is a Potent Growth Activator of Mouse Primordial Germ Cells in Vitro
$ y' e1 j0 p# K* p5 H* o1996 Autonomous Regulation of Proliferation and Growth Arrest in Mouse Primordial Germ Cells Studied by Mixed and Clonal Cultures# Q& t* z, L( g& \
1998 In vitro adhesiveness of mouse primordial germ cells to cellular and extracellular matrix component substrata: q/ F- `7 _& h
1998 Role of Fibroblast Growth Factors and Their Receptors in Mouse Primordial Germ Cell Growth
' o9 Y7 |/ v  J0 c2000 A Role for E-cadherin in Mouse Primordial Germ Cell Development
% I0 j! Y+ T9 G, E9 Q2000 Regulation of primordial germ cell development in the mouse
7 t6 c+ t$ w6 c0 c2001 The allocation and differentiation of mouse primordial germ cells
7 A5 _  q! _3 H  g, j; e2001 Twenty years of research on primordial germ cells, t$ W* L. ^1 x; y3 R% U
2003 Developmental fate of embryonic germ cells (EGCs), in vivo and in vitro5 H4 m( g2 P4 g# {
2003 Primordial germ cells in the mouse
; H- W* ], I" z+ K. j) }- K2003 Purification of mouse primordial germ cells by Nycodenz
. r6 h! w4 O0 h7 G6 Z0 d( I2004 Autocrine and Paracrine Mechanisms Regulating Primordial Germ Cell Proliferation: F  w1 M" T$ y
2004 BMP signaling mediated by ALK2 in the visceral endoderm is necessary for the generation of primordial germ cells in the mouse embryo
, k/ Y+ G- H5 H8 ?7 H* E* G2004 Experimental approaches to the study of primordial germ cell lineage and proliferation% a, Y  w$ W* m" O* H; z9 n. ]0 R
2004 Oct4 is required for primordial germ cell survival
, E, d# L2 T" @! j8 |: w8 S2004 Regulatory role of BMP2 and BMP7 in spermatogonia and Sertoli cell proliferation in the immature mouse.
! Q: W/ h/ t6 T/ v2005 Growth factors sustain primordial germ cell survival, proliferation and entering into meiosis in the absence of somatic cells
/ W; B4 g# g! b4 z( t% j
- Q5 Y' U2 `: f$ Q" n7 C上面全部是小鼠的PGC分离,培养,鉴定和信号调节的文章,不全,但比较有用.你可以挑你感兴趣的看

细胞海洋

回复 chenkang91 的帖子
/ ^8 I; Z9 U( U  H4 F/ x) v: `% J3 u  s% Z" ?
建议你发新帖提问

chenkang91

您好，学生我刚开始着手做ES分化到PGC方面的实验。参照的是2011-Reconstitution of the mouse germ cell specification pathway in culture by pluripotent stem cells.其中涉及到ES细胞无feeder培养的问题。我现在的问题是没有确定的Qi-Long Ying的N2B27培养基的配方，现在实验室是否有具体的ES无feeder培养方法？

ppcl2

恩，就是夏国良门下的那个王海滨，胖小子虽然还是新人，但人家跟老夏比已算青出于蓝胜于蓝了，这老夏自己也承认的，其他几个就目前的业绩就比不过他了，他是实打实在国外名牌大学拿过tenure track AP的，独立后自己也已经发过高水平论文，现在有安民照着，以后大概其能行。动物所有个遭Chris挤兑的千人，要全职回去的话，水平十分了得。

ellapan

回复 6# ppcl2 9 M/ p7 J' T3 c# p% [- h
2 a5 X7 A  }! l( B3 z7 |
7 u8 L3 S8 _0 l% \* Z
    真的假的 是夏国良门下的那个王海滨？他还只是新人 虽然成绩不错可是我看也没达到独领风骚的境界呀

ppcl2

看了一下你说的那几个人，国内做生殖细胞，以后估计是王海滨的天下，其他人跟他比顶多算灌水专家。

ppcl2

! ~3 V$ D( W( ^3 B7 i; b
8 t5 M9 C( b0 d7 {  K/ U& P, F
哈哈，你说的这些人一个也没听说过，当然不是说他们不牛，俺不做PGC已经n年了，现在只是偶尔看一下，关注一下进展，但对目前的状况并没有一个整体的把握。- x3 s7 j  r3 G  @6 d
我说表观遗传重要，但并不是说他最重要，因为现在并没有证据证明这些表观遗传的变化是原因还是结果，但频繁的变化肯定是有其重要作用，这是已知的事实。& ~) m2 g8 t  _, p) O8 b% R
能从ES分化出PGC来，这个更是很多人已经实践过的事情，科研需要一种脚踏实地的奉献精神，还要有开拓精神，现在基本的东西还远没搞清楚，盲目去搞应用，肯定是会失败而终，当然基础是为将来的应用打基础的，PGC的研究远比ES要早，100多年了，结果现在比研究了30来年的ES要落后许多，如和形成，如何迁移，如何扩增，如何风化每一步都有很多事情需要去做，特别是in vivo的东西。Anne McLaren，Brigid Hogan，Azim Surani，Wolf Reik， Ruth Lehmann，Haifan Lin, Chris Wylie，Mitinori Saitou，Yasuhisa Matsui等等还是做了不少东西，特别是Surani A.的东西蛮有意思的, 已过逝的老太太McLaren A.是最值得尊敬的和学习的。

ellapan

回复 3# ppcl2
& \8 P/ B4 f% h! ~" R  R; [% v7 W8 ^5 k2 w1 B7 {$ Z
   呵呵 我就是做小鼠PGC的，过去的一年一直做表观遗传之类的，现在实验基本开始收尾，目前开始作ES向PGC分化方面的 具体思路还没形成 希望你多多指导6 Q2 d& ?% a4 P1 e
  补充一下 目前国内作PGC比较牛的人有动物所的几个大牛 像孙青原等人，还有科大的史清华和孙斐等人 国内的还有沈伟等人7 I( {8 [  P7 g
你说的表观遗传其实我个人觉得其实单独来说没有那么王道 我想听听你的看法

ppcl2

9 }5 U9 F6 i3 k- }: }
/ X  `$ ^# q; u* G) |- B
国内现在谁做老鼠或人的PGC比较牛？谢谢！
; L' g+ R. X4 P9 |# P" C  N现在光养一养，已经不行了吧，分子调控，表观调控才是王道。

jiejesse

很好