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PGC的培养 补充中 [复制链接]

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金话筒 优秀会员

楼主
发表于 2010-3-8 17:47 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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欢迎加入讨论,如果你做PGC的培养,请注意她的时间段,小鼠是胚胎期E13.5以前称PGC,人胚胎期E5-9week称PGC,此后停留在G1/G0的Mitosis arrest期,直到出生后才开始恢复有丝分裂" p' s% E& p' ^6 m2 A1 D

4 U! |9 s) o9 m4 n# I如果你刚接触,我推荐你看看下面的文章
1 h, @- ?9 p5 a2 |/ G+ M1992 long-term proliferation of mouse primordial germ cells in culture+ o/ O. J0 r  s- v
1993 Proliferation of Mouse Primordial Germ Cells in Vitro A Key Role for cAMP8 v/ o: W5 ~! ~0 P
1994 Role of leukemia inhibitory factor and its receptor in mouse primordial germ cell growth
$ y+ d* S8 ~- S' l8 X: }5 ^$ ]" g1995 Purification of Mouse Primordial Germ Cells by MiniMACS Magnetic Separation System
# _( x9 X0 F+ ~! |, `( C5 ~1995 Retinoic Acid Is a Potent Growth Activator of Mouse Primordial Germ Cells in Vitro
1 P+ T0 o1 @( G# Y! s2 @1996 Autonomous Regulation of Proliferation and Growth Arrest in Mouse Primordial Germ Cells Studied by Mixed and Clonal Cultures9 `6 Y# Z' ~6 g3 j1 u! K  C
1998 In vitro adhesiveness of mouse primordial germ cells to cellular and extracellular matrix component substrata- i9 R5 V, J, b, k* }
1998 Role of Fibroblast Growth Factors and Their Receptors in Mouse Primordial Germ Cell Growth# ?: q2 G% g1 }6 A( z
2000 A Role for E-cadherin in Mouse Primordial Germ Cell Development
& \, t. Z# b' g: d/ V  A" ]2000 Regulation of primordial germ cell development in the mouse3 g7 k# U; I8 n& g+ k
2001 The allocation and differentiation of mouse primordial germ cells
1 Q9 R5 H& g7 w! i/ O/ v& K3 R2001 Twenty years of research on primordial germ cells
' Q/ Z) u  t; W. Z+ `  F2003 Developmental fate of embryonic germ cells (EGCs), in vivo and in vitro5 v( W( @+ p4 |
2003 Primordial germ cells in the mouse0 p- ]& V( Y9 d- n) g
2003 Purification of mouse primordial germ cells by Nycodenz3 k$ \' ^# J/ O& T
2004 Autocrine and Paracrine Mechanisms Regulating Primordial Germ Cell Proliferation
+ u( ~: h$ `3 _2004 BMP signaling mediated by ALK2 in the visceral endoderm is necessary for the generation of primordial germ cells in the mouse embryo% y+ J5 u* z& L0 ?
2004 Experimental approaches to the study of primordial germ cell lineage and proliferation" f. g8 J; {" k9 p( B3 T. |
2004 Oct4 is required for primordial germ cell survival
& O. z2 b, }+ m: k0 P8 @2004 Regulatory role of BMP2 and BMP7 in spermatogonia and Sertoli cell proliferation in the immature mouse.
$ M& K- K# \6 z2 {( `2005 Growth factors sustain primordial germ cell survival, proliferation and entering into meiosis in the absence of somatic cells
+ [, ]3 I; K6 Z! T1 Q
6 Z' V% R# q3 l+ v' s. g; R; Z+ |上面全部是小鼠的PGC分离,培养,鉴定和信号调节的文章,不全,但比较有用.你可以挑你感兴趣的看
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沙发
发表于 2010-4-6 22:45 |只看该作者
很好

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藤椅
发表于 2010-4-7 05:40 |只看该作者
本帖最后由 ppcl2 于 2010-4-7 05:43 编辑 & l* S3 E/ @7 ~8 N8 C
4 m, l* U5 ^. Z7 k& v0 N7 `! h2 U
国内现在谁做老鼠或人的PGC比较牛?谢谢!4 T( ~% S1 Z+ @" K
现在光养一养,已经不行了吧,分子调控,表观调控才是王道。

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板凳
发表于 2010-4-7 18:20 |只看该作者
回复 3# ppcl2 3 {# v) l4 v" K
# O# b5 l4 F2 e9 H% G
   呵呵 我就是做小鼠PGC的,过去的一年一直做表观遗传之类的,现在实验基本开始收尾,目前开始作ES向PGC分化方面的 具体思路还没形成 希望你多多指导  e8 q  ?( c7 }/ ~- T7 C
  补充一下 目前国内作PGC比较牛的人有动物所的几个大牛 像孙青原等人,还有科大的史清华和孙斐等人 国内的还有沈伟等人
# c" p# V) w/ e你说的表观遗传其实我个人觉得其实单独来说没有那么王道 我想听听你的看法
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报纸
发表于 2010-4-8 01:17 |只看该作者
本帖最后由 ppcl2 于 2010-4-8 01:20 编辑
5 o+ y* G( G- z4 t9 ^+ H* q8 j  \, I5 A$ }& U* h
哈哈,你说的这些人一个也没听说过,当然不是说他们不牛,俺不做PGC已经n年了,现在只是偶尔看一下,关注一下进展,但对目前的状况并没有一个整体的把握。* s0 n5 o/ o+ q  P6 i; ^
我说表观遗传重要,但并不是说他最重要,因为现在并没有证据证明这些表观遗传的变化是原因还是结果,但频繁的变化肯定是有其重要作用,这是已知的事实。, m: M- ]( p1 ?8 [, H0 V  e" |  I
能从ES分化出PGC来,这个更是很多人已经实践过的事情,科研需要一种脚踏实地的奉献精神,还要有开拓精神,现在基本的东西还远没搞清楚,盲目去搞应用,肯定是会失败而终,当然基础是为将来的应用打基础的,PGC的研究远比ES要早,100多年了,结果现在比研究了30来年的ES要落后许多,如和形成,如何迁移,如何扩增,如何风化每一步都有很多事情需要去做,特别是in vivo的东西。Anne McLaren,Brigid Hogan,Azim Surani,Wolf Reik, Ruth Lehmann,Haifan Lin, Chris Wylie,Mitinori Saitou,Yasuhisa Matsui等等还是做了不少东西,特别是Surani A.的东西蛮有意思的, 已过逝的老太太McLaren A.是最值得尊敬的和学习的。
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地板
发表于 2010-4-8 10:16 |只看该作者
看了一下你说的那几个人,国内做生殖细胞,以后估计是王海滨的天下,其他人跟他比顶多算灌水专家。

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7楼
发表于 2010-4-8 15:05 |只看该作者
回复 6# ppcl2 6 W0 R' n8 Y% w4 P( z% {

/ c5 V5 l: z" ?1 W- a
# p8 r" p0 t8 W1 C    真的假的 是夏国良门下的那个王海滨?他还只是新人 虽然成绩不错可是我看也没达到独领风骚的境界呀

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8楼
发表于 2010-4-9 00:49 |只看该作者
恩,就是夏国良门下的那个王海滨,胖小子虽然还是新人,但人家跟老夏比已算青出于蓝胜于蓝了,这老夏自己也承认的,其他几个就目前的业绩就比不过他了,他是实打实在国外名牌大学拿过tenure track AP的,独立后自己也已经发过高水平论文,现在有安民照着,以后大概其能行。动物所有个遭Chris挤兑的千人,要全职回去的话,水平十分了得。

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9楼
发表于 2016-2-24 23:45 |只看该作者
您好,学生我刚开始着手做ES分化到PGC方面的实验。参照的是2011-Reconstitution of the mouse germ cell specification pathway in culture by pluripotent stem cells.其中涉及到ES细胞无feeder培养的问题。我现在的问题是没有确定的Qi-Long Ying的N2B27培养基的配方,现在实验室是否有具体的ES无feeder培养方法?
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10楼
发表于 2016-2-25 14:56 |只看该作者
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