PGC的培养 补充中

ellapan

欢迎加入讨论,如果你做PGC的培养,请注意她的时间段,小鼠是胚胎期E13.5以前称PGC,人胚胎期E5-9week称PGC,此后停留在G1/G0的Mitosis arrest期,直到出生后才开始恢复有丝分裂) ?. X! f3 A! u+ d# ?; \

/ S$ O& O8 U' J/ W如果你刚接触,我推荐你看看下面的文章
. }7 B" E- Q$ Q- M: y' E1992 long-term proliferation of mouse primordial germ cells in culture
& t, ?/ u  Z. \  D" u, K1993 Proliferation of Mouse Primordial Germ Cells in Vitro A Key Role for cAMP) d3 A8 S9 L3 R
1994 Role of leukemia inhibitory factor and its receptor in mouse primordial germ cell growth
7 J& V% K# X; I, f3 y1995 Purification of Mouse Primordial Germ Cells by MiniMACS Magnetic Separation System" A  V/ n2 k" _! p- E
1995 Retinoic Acid Is a Potent Growth Activator of Mouse Primordial Germ Cells in Vitro# C7 e( Z7 V3 o* \- y
1996 Autonomous Regulation of Proliferation and Growth Arrest in Mouse Primordial Germ Cells Studied by Mixed and Clonal Cultures, g) I0 Z" ?6 x. v0 ^
1998 In vitro adhesiveness of mouse primordial germ cells to cellular and extracellular matrix component substrata* |/ I5 M( N) h9 i8 f8 U7 q- v
1998 Role of Fibroblast Growth Factors and Their Receptors in Mouse Primordial Germ Cell Growth
% W/ p6 C1 `4 J. E5 ~8 m5 a) u2000 A Role for E-cadherin in Mouse Primordial Germ Cell Development  @% }* K* D0 q$ n' s4 y
2000 Regulation of primordial germ cell development in the mouse( T5 t9 _7 r& N& s3 `1 V
2001 The allocation and differentiation of mouse primordial germ cells
' {( ^5 a5 c) F2001 Twenty years of research on primordial germ cells
! C* C- j" D# U2003 Developmental fate of embryonic germ cells (EGCs), in vivo and in vitro
2 T+ {& R8 _: u' G/ `2003 Primordial germ cells in the mouse
) A2 R0 J/ q5 A% Z2003 Purification of mouse primordial germ cells by Nycodenz" t) c7 H; ~! ]$ V" `$ D; R
2004 Autocrine and Paracrine Mechanisms Regulating Primordial Germ Cell Proliferation  E9 v, @$ ?+ i
2004 BMP signaling mediated by ALK2 in the visceral endoderm is necessary for the generation of primordial germ cells in the mouse embryo
3 [' m" Z3 }8 J5 K: g  i2 b# H2004 Experimental approaches to the study of primordial germ cell lineage and proliferation
- k7 @& |# l. u# F+ w7 E, F+ T  O2004 Oct4 is required for primordial germ cell survival$ H1 P& J# d/ F6 x0 Q7 b
2004 Regulatory role of BMP2 and BMP7 in spermatogonia and Sertoli cell proliferation in the immature mouse.+ Z/ ?, n) R1 z
2005 Growth factors sustain primordial germ cell survival, proliferation and entering into meiosis in the absence of somatic cells
  Q6 K5 a% s" {' S& p3 o) k7 d1 I6 N4 a0 Q* M& {
上面全部是小鼠的PGC分离,培养,鉴定和信号调节的文章,不全,但比较有用.你可以挑你感兴趣的看

jiejesse

很好

ppcl2

4 ]* A7 C, W# ?* ]  Z5 O8 G
) S6 X" M* J* G# m( P国内现在谁做老鼠或人的PGC比较牛？谢谢！
$ \: ?" e; I; y( K, k) `8 W4 @现在光养一养，已经不行了吧，分子调控，表观调控才是王道。

ellapan

回复 3# ppcl2 ' s+ k# i- v& }# i
) E+ l, g6 H  r
   呵呵 我就是做小鼠PGC的，过去的一年一直做表观遗传之类的，现在实验基本开始收尾，目前开始作ES向PGC分化方面的 具体思路还没形成 希望你多多指导
7 Q9 J2 B" P* Z* Q2 l! |  补充一下 目前国内作PGC比较牛的人有动物所的几个大牛 像孙青原等人，还有科大的史清华和孙斐等人 国内的还有沈伟等人
. M0 v% r% ]1 a2 X; E6 i: g9 _你说的表观遗传其实我个人觉得其实单独来说没有那么王道 我想听听你的看法

ppcl2

  h1 Z! p. Q- I/ B( L) j  i. R& B2 ~' W6 R, L$ g2 h+ w6 Z4 W4 l
哈哈，你说的这些人一个也没听说过，当然不是说他们不牛，俺不做PGC已经n年了，现在只是偶尔看一下，关注一下进展，但对目前的状况并没有一个整体的把握。3 @: k3 ^# t# U( Y, b, b; L
我说表观遗传重要，但并不是说他最重要，因为现在并没有证据证明这些表观遗传的变化是原因还是结果，但频繁的变化肯定是有其重要作用，这是已知的事实。
" y) r8 Y5 C& A% P$ k' }9 X 能从ES分化出PGC来，这个更是很多人已经实践过的事情，科研需要一种脚踏实地的奉献精神，还要有开拓精神，现在基本的东西还远没搞清楚，盲目去搞应用，肯定是会失败而终，当然基础是为将来的应用打基础的，PGC的研究远比ES要早，100多年了，结果现在比研究了30来年的ES要落后许多，如和形成，如何迁移，如何扩增，如何风化每一步都有很多事情需要去做，特别是in vivo的东西。Anne McLaren，Brigid Hogan，Azim Surani，Wolf Reik， Ruth Lehmann，Haifan Lin, Chris Wylie，Mitinori Saitou，Yasuhisa Matsui等等还是做了不少东西，特别是Surani A.的东西蛮有意思的, 已过逝的老太太McLaren A.是最值得尊敬的和学习的。

ppcl2

看了一下你说的那几个人，国内做生殖细胞，以后估计是王海滨的天下，其他人跟他比顶多算灌水专家。

ellapan

回复 6# ppcl2
* f6 ~, t  h1 P) Z9 j8 ^- ]& r6 U6 f) e$ r& R
9 C8 Y" m* P6 a& y
    真的假的 是夏国良门下的那个王海滨？他还只是新人 虽然成绩不错可是我看也没达到独领风骚的境界呀

ppcl2

恩，就是夏国良门下的那个王海滨，胖小子虽然还是新人，但人家跟老夏比已算青出于蓝胜于蓝了，这老夏自己也承认的，其他几个就目前的业绩就比不过他了，他是实打实在国外名牌大学拿过tenure track AP的，独立后自己也已经发过高水平论文，现在有安民照着，以后大概其能行。动物所有个遭Chris挤兑的千人，要全职回去的话，水平十分了得。

chenkang91

您好，学生我刚开始着手做ES分化到PGC方面的实验。参照的是2011-Reconstitution of the mouse germ cell specification pathway in culture by pluripotent stem cells.其中涉及到ES细胞无feeder培养的问题。我现在的问题是没有确定的Qi-Long Ying的N2B27培养基的配方，现在实验室是否有具体的ES无feeder培养方法？

细胞海洋

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