关于脐带消化的问题

zhujiang007

大家都用的什么酶来消化脐带啊？如何建立脐带量和酶量的关系？

wuxiao101325

2型胶原酶+胰酶，37度1小时，2ml酶液消化1cm脐带

zhujiang007

回复 2# wuxiao101325 2 k2 [" [- B3 h- Y
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    你用的是双酶法，胰酶的作用力很强，稍有不慎会对细胞损害，我只用胶原酶消化，但是量非常大，时间很长，你有何想法？

wuxiao101325

你所说的损害是否细胞不生长或长得少？

wuxiao101325

据我们实验室的经验，双酶法与单酶法（过夜）效果差不多，也没见细胞有什么明显的损害

wuxiao101325

http://www.stemcell8.cn/viewthread.php?tid=18220&extra=

niyou

我们用的是0.1% 2型胶原酶+0.05%胰酶（Gibco,含0.02%EDTA）1:1混合，37度消化30分钟。注意脐带保温及无菌操作，两头用动脉夹夹住或丝线扎紧，放入预温的无菌大培养皿（加有37度PBS）中，37度培养箱中放30分钟。水浴锅太脏，尽可能不用。

penny200903

“两头用动脉夹夹住或丝线扎紧”请问这样做所起的作用是什么？这样有利于把间充质消化出来吗？

157238360jwj

我们用的是（胶原酶1+透明质酸酶+Dispace）全是2mg/ml,胶原酶1加2ml，其余两种加1ml,37度培养箱20小时。。

xiaodiao123

我也只用胶原酶消化，用量较大，时间比较长，学习了