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我的细胞在培养中也遇到过这种情况：“污染物为颗粒状，能自由游动（！），其中大部分是固定在瓶底的，瓶中细胞都死亡，且能明显的看到这些污染物沿细胞边缘排列。此外，培养基颜色并未发生明显的改变” 。肯定不是常见细菌污染，他们在400x下清晰可见，要比常见的球菌小非常多，而且在其生长密度很大的情况下，培养液也不会变色变混。应该也不是支原体污染，我们做过支原体检测，呈阴性，而且添加泰乐菌素培养对其也没有抑制作用。胶虫污染，我们尝试更换了各种血清（paa，gibco，hyclone），无效。- g/ y- x. ^1 }, r; A G6 u, V
由于污染细胞来自于其他实验室馈赠，无法丢弃，目前仍然没有找到将其彻底清除的办法。分享一点我们的心得：1、此污染与细胞生长明显呈竞争关系，细胞密度大生长快，就不会受影响，细胞密度低，培养一段时间后就会出现楼主所述情况，建议传代时将细胞尽量分散均匀，提高接种密度。2、有此污染的细胞，传代后明显可见培养液中有比细胞小很多的杂质，很脏，每次传代后其增殖势头加快，建议传代时采用低俗离心的方法将细胞与其分离，500转以下离心可有效的将细胞与其分离。3、此种污染可以通过培养箱中空气传播，建议将由污染的细胞使用单独培养箱培养，使用培养皿培养被污染的几率较高。 |
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发表于 2010-4-21 23:39
