用加抗生素的盐水能洗去菌吗

baoweih

请教各位老师，用加了抗生素的培养基培养细胞，如果有菌的话，14天内会死掉吗，还是只是抑制它生长？加抗生素洗涤能洗去吗

保罗闫

这个还真没试过唉。

阿秀哥

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* K; ~) x3 {, }, n处理细菌污染的重要原则就是：无限地稀释细菌的浓度，无限地减少细菌的数量！
! U! T. v$ m3 g8 O; r+ t3 U; I1）.将污染的培养液倒掉，转烧瓶口，加入10mlPBS，适当晃动清洗培养瓶，然后倒掉。转烧瓶口。4 [( q& _6 J  y# h
2）.继续加入10mlPBS，同样方法晃动，清洗培养瓶，然后倒掉。
, M, @' {; |# A' Z. {0 Y0 Y) H3）.继续加入5mlPBS，同样方法洗瓶，主要是培养面，然后倒掉。
% {- M0 J7 z& J8 E; m0 M0 }4）.重复步骤3再洗。- g* f- x% r9 \+ i
5）.重复步骤3再洗。
+ b2 m! m5 M0 z4 X6）.加入3-5ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。
: j2 T! V; p" H3 B7 X* E1 ^7）.加入3ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。
0 N6 S$ c4 r! j3 z8）.再加入5mlPBS洗瓶，然后吸出。, L$ w" d4 o) N1 ^. _1 r% X; Q4 J
9）.加入10ml培养液，加入2ml双抗，放置培养箱培养，5小时之后，倒掉培养基，加入PBS洗瓶两次，然后加入胰酶消化，吹打后置于离心机800-1000r/min离心，然后洗一次。置于新的培养瓶里培养，培养体系加入2ml双抗。
8 u( h4 P2 L& ?8 l10）.24h之后，视情况换液，若仍然污染严重，培养基浑浊，重复以上步骤，若看不到污染物，则继续步骤1)、3）、4）、6）、8），然后加入培养液培养，培养体系加入2ml双抗.
. q) k' z: Y3 q/ I0 Q$ K$ i8 W11).24h之后，若仍污染严重，可再重复一次，若还污染只能弃之（不过一般没有出现这种情况），若镜下不见污染物，则换液PBS洗瓶，正常培养。. I) F+ Z2 ^6 n( a) a  }1 p
    以上是对于细菌污染（常见为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌）；若为霉菌或者真菌污染，加入两性霉素B清洗和培养，终浓度一般为2.5μg/ml（在30μg/ml时会有细胞毒性）。另外也可以选择在培养基里加3ug/ml的制霉菌素或放线菌素D。其它操作同。
' n9 l! A! \0 W+ }' z) Q4 }希望对你有用。

快乐男孩

回复 baoweih 的帖子; h2 }/ R% M8 L

6 h6 P$ t7 s1 O9 q如果污染的话建议放弃样本吧。很难控制。

没有名字H

只能抑菌不能除菌，而且细菌量太多也没用的，细胞培养的话污染建议丢弃