关于大鼠骨髓间充质干细胞培养问题

cmw930922

5 K6 K  b: x& [这是P1的大鼠骨髓间充质干细胞，从实验到现在也做了有五批了，有一下问题想请假大家' W1 ]% |; R% B( H2 q) u9 K
1.图片中体积很大的，成空泡状的是什么细胞' z* [6 y" D, G
2.我同时用低糖DMEM、α-MEM、DMEM/F12培养基养，血清是GIBICO的南美（买不起澳胎）感觉中间的增殖最快，最后的形态好，前者不怎么样，不知道大家是怎么样的4 \+ Y5 k9 U4 j* s2 e
3.由于实验条件有限，我每次取出大鼠的股骨和胫骨都要等4个小时左右才能取出细胞，不知道这样对细胞活力影响是否会很大! O- _6 l1 v' Q  ?
4.一般大家养大鼠的BMSC能养到第几代，我的细胞老化比较快，p2要7天左右才能传一代

henryjia

建议：
# ?  h8 Q( Q5 q* U. W1. 传代一次观察是否有好转. w# D' E9 W4 O; @- r# c8 R
2.传代时，胰酶处理时间控制在2分钟内，只收取脱壁细胞
9 W# t# C' [7 J& c1 W7 e' @! X- j+ J" b  n
往往原代和一代细胞时会有不纯，传代也是净化提纯过程。8 D  k, ]0 B4 u5 S7 q

  v. C5 m/ d8 U. f7 R1 V祝好运！