关于滋养层细胞（3T3） - ips专区干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

Rank: 1

积分: 12
威望: 12
包包: 352

楼主

发表于 2010-4-30 10:38 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

我用的3T3细胞做滋养层细胞
现在有一点不明白
有人说要用丝裂霉素C处理3T3细胞
然后再接种到有明胶的培养瓶8 q0 Y! X3 V. ? C
有人说是接种到有明胶的培养瓶4 V4 S; \4 u4 K8 W2 L6 J
再用丝裂霉素C处理
哪种比较好呢

已有 1 人评分	包包	收起理由
细胞海洋	+ 5	欢迎参与讨论

总评分: 包包 + 5 查看全部评分

回复引用

Rank: 1

积分: 19
威望: 19
包包: 89

沙发

发表于 2010-4-30 10:48 |只看该作者

一般是用丝裂霉素C处理过然后再种到有明胶铺的培养皿比较好，我们实验室是这样做的，那样如果觉得3T3比较稀的话，还可以再加3T3细胞，不过两者都可以，看你习惯吧！

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 5	+ 10	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5 包包 + 10 查看全部评分

回复引用

Rank: 3 Rank: 3

积分: 312
威望: 312
包包: 329

优秀会员

藤椅

发表于 2010-4-30 10:49 |只看该作者

当然是先用丝链霉素c先处理然后再接种到饲养层上了，你说的那种先接种到有明胶的培养瓶( B+ ^, ~" V. z& M$ p
再用丝裂霉素C处理只是将处理前的3T3放到明胶处理的培养瓶上而已，为了3t3更好的贴壁罢了。最后还是要接种到明胶处理培养瓶中的。

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 5	+ 10	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5 包包 + 10 查看全部评分

回复引用

Rank: 3 Rank: 3

积分: 312
威望: 312
包包: 329

优秀会员

板凳

发表于 2010-4-30 10:49 |只看该作者

哦，刚才第一句说错了，是处理后接种到培养瓶中

回复引用

zjkenan

Rank: 1

积分: 12
威望: 12
包包: 352

报纸

发表于 2010-4-30 10:51 |只看该作者

那我还有个问题啊
就是为什么我用丝裂霉素C处理的细胞
放在油明胶的培养瓶里就不贴壁呢
我用的10ug/ml的丝裂霉素C处理了2h

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 2	+ 5	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2 包包 + 5 查看全部评分

回复引用

Rank: 3 Rank: 3

积分: 312
威望: 312
包包: 329

优秀会员

地板

发表于 2010-4-30 10:58 |只看该作者

我用的就是10ug/ml的丝裂霉素C处理了2h没有问题。能够很好的贴壁

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 5	+ 5	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5 包包 + 5 查看全部评分

回复引用

zjkenan

Rank: 1

积分: 12
威望: 12
包包: 352

7楼

发表于 2010-4-30 11:01 |只看该作者

难道是我的明胶有问题么/ c( l7 M; l2 y8 S
我的明胶是0.1%高温消毒的( _- h5 S0 l5 r! }( ]6 g
存在4°
那你明胶怎么用的呢

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 2	+ 5	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2 包包 + 5 查看全部评分

回复引用

Rank: 3 Rank: 3

积分: 312
威望: 312
包包: 329

优秀会员

8楼

发表于 2010-4-30 11:05 |只看该作者

明胶的浓度就是你用的0.1%的，我先是高压灭菌，然后滤一下放到四度保存

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 2	+ 5	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2 包包 + 5 查看全部评分

回复引用

hansey

Rank: 3 Rank: 3

积分: 683
威望: 683
包包: 1343

优秀会员热心会员帅哥研究员小小研究员

9楼

发表于 2010-5-3 21:12 |只看该作者

回复 5# zjkenan # S: k4 e4 N6 K2 L# r
- T8 V) R; i. {1 j2 D5 \
; K9 x2 r8 w6 M7 a+ f' c/ c
消化过了？

回复引用

powerwang521