关于滋养层细胞（3T3）

zjkenan

我用的3T3细胞做滋养层细胞7 c& I9 ], [7 m+ f1 O: l4 c
现在有一点不明白) R8 u# G' G- H& S: {: A
有人说要用丝裂霉素C处理3T3细胞
' E/ u( C* P1 W然后再接种到有明胶的培养瓶5 g; z  K  p. [# r4 v
有人说是接种到有明胶的培养瓶  k) U; F( ]7 u6 n% r$ o5 }& f
再用丝裂霉素C处理
$ c8 z$ }. X$ M) b# u  X3 W6 L/ r; Y哪种比较好呢

welldoneding

一般是用丝裂霉素C处理过然后再种到有明胶铺的培养皿比较好，我们实验室是这样做的，那样如果觉得3T3比较稀的话，还可以再加3T3细胞，不过两者都可以，看你习惯吧！

wyannb

当然是先用丝链霉素c先处理然后再接种到饲养层上了，你说的那种先接种到有明胶的培养瓶7 C3 x# I, A% |( v) h1 a1 {- j
再用丝裂霉素C处理只是将处理前的3T3放到明胶处理的培养瓶上而已，为了3t3更好的贴壁罢了。最后还是要接种到明胶处理培养瓶中的。

wyannb

哦，刚才第一句说错了，是处理后接种到培养瓶中

zjkenan

那我还有个问题啊
2 A0 ~8 d: {9 X, }0 f, n/ J就是为什么我用丝裂霉素C处理的细胞
* V! g( w# w7 K; C' B放在油明胶的培养瓶里就不贴壁呢
% k- r: M& p3 O7 u我用的10ug/ml的丝裂霉素C处理了2h

wyannb

我用的就是10ug/ml的丝裂霉素C处理了2h没有问题。能够很好的贴壁

zjkenan

难道是我的明胶有问题么  Y" ]7 V+ ^/ ?" ^6 k) ?
我的明胶是0.1%高温消毒的
2 V9 a3 K7 {) `8 O( ^1 ^存在4°
$ ~% n+ e) D, \% c( G& v那你明胶怎么用的呢

wyannb

明胶的浓度就是你用的0.1%的，我先是高压灭菌，然后滤一下放到四度保存

hansey

回复 5# zjkenan 5 A9 S5 K* D: }  o" K& [
' X6 ]6 ^2 o7 A' A

6 F5 X5 b* M# C& \' a4 v0 X" _消化过了？

powerwang521

请问LZ用3T3做滋养层养的是ips吗？