关于滋养层细胞（3T3）

zjkenan

我用的3T3细胞做滋养层细胞4 S" H, I% T0 B& g6 r* D
现在有一点不明白. W2 p% W9 W7 p6 g: ]" L( s2 J" L  d
有人说要用丝裂霉素C处理3T3细胞6 A: Q0 E& e& d' h# w
然后再接种到有明胶的培养瓶7 X' P8 S! E1 U) z0 C+ u
有人说是接种到有明胶的培养瓶0 Q# P4 T9 Z  M2 p
再用丝裂霉素C处理
7 h: \. `; A+ `1 ~# ~; W0 Y4 |哪种比较好呢

welldoneding

一般是用丝裂霉素C处理过然后再种到有明胶铺的培养皿比较好，我们实验室是这样做的，那样如果觉得3T3比较稀的话，还可以再加3T3细胞，不过两者都可以，看你习惯吧！

wyannb

当然是先用丝链霉素c先处理然后再接种到饲养层上了，你说的那种先接种到有明胶的培养瓶: F8 ~2 F- h& Y
再用丝裂霉素C处理只是将处理前的3T3放到明胶处理的培养瓶上而已，为了3t3更好的贴壁罢了。最后还是要接种到明胶处理培养瓶中的。

wyannb

哦，刚才第一句说错了，是处理后接种到培养瓶中

zjkenan

那我还有个问题啊/ G3 C4 ]* m4 ^& k) f0 m, w
就是为什么我用丝裂霉素C处理的细胞
  I/ F& S- M7 i5 g5 \放在油明胶的培养瓶里就不贴壁呢6 {. G# e5 g- ]6 y4 {: g
我用的10ug/ml的丝裂霉素C处理了2h

wyannb

我用的就是10ug/ml的丝裂霉素C处理了2h没有问题。能够很好的贴壁

zjkenan

难道是我的明胶有问题么7 ^, U, j7 T" I8 k& q3 y
我的明胶是0.1%高温消毒的
( u! y8 {. c5 i( j0 _7 `$ g7 e: P5 X+ c+ n存在4°
5 V1 M. e. U+ m" N; p那你明胶怎么用的呢

wyannb

明胶的浓度就是你用的0.1%的，我先是高压灭菌，然后滤一下放到四度保存

hansey

回复 5# zjkenan - T* F% ?4 v, o) ]5 D, d# g- x
5 ~. H0 {; Q) j
7 U; h/ o5 ], w& |) z- Z
消化过了？

powerwang521

请问LZ用3T3做滋养层养的是ips吗？