LIF应该如何稀释呢？10-7次方的

上海过客

LIF应该如何稀释呢？10-7次方的
* f) t% {. D7 ?# g# a  O
4 R2 `5 D! J- F7 T买了够配10升培养基的LIF应该如何稀释呢？
+ H. ~' P; j. x7 @6 i& C5 o
/ z. C$ x5 T* B  e想把它小量分装了 。  250ML 或者 500ML的 量 。! I% n- d7 ]2 j2 o

, t8 l  e: G1 n1ML 的母液用着感觉 不好  ，浓度降一点 ，分装一下 。
! p5 ~8 |& I9 r
0 q- w; ?+ _6 F3 m; _做过的 ，请不吝赐教

周会

我买的是10-6次方的 ，不稀释直接用，每次加千分之一！

wyannb

我买的直接就是10六次方Iu的，用多少加多少，这个在四度保存也用不着分装啊。要是-20的话分装还可以。

上海过客

10-7 的 价格 便宜啊 。

tianangelt

回复 4# 上海过客
# n0 K% g" R/ a  a. \7 {+ s
/ ?8 A( k2 Z  Q2 n8 [3 M
3 l! U# Y/ Z4 p* R    您好，请问您用LIF是用来养干细胞的吗？我也在做，想和您交流一下。

hcoohboy

我买的是Chemicon公司的，四度保存，不需要分装，除非很多人用，每人分一支

上海过客

回复  上海过客
' o5 w# V" I& F3 o1 h0 H. p$ A, C/ E; m$ v/ \; P1 {
+ J+ n  H. C& n* C
    您好，请问您用LIF是用来养干细胞的吗？我也在做，想和您交流一下。( v5 Z) U3 y1 X
tianangelt 发表于 2010-5-5 10:15

# g4 v% ?2 @4 O/ I$ V7 i2 J- H( }" e  i% @) V0 L9 I0 k
是培养 干细胞的 。

上海过客

10-7 的包装 盖子比较讨厌 ，不是螺旋盖，好像胶头总会有一些溶液，看着挺可惜的。
4 O8 O1 y3 y$ R# b! \7 `4 \! a
2 d- Y! h9 }$ V5 s: Q4 q所以  想分装一下  扩大一下体积 ，损耗小一点

qgjin

3 S0 G) s& x  \* `- z
# J. n  h! S) H6 J; D, z3 j" g1ml稀释成10L？   你先看看标签， 是不是有PBS稀释的；要是是 请如下操作；8 L# Y! s2 a9 }9 `1 l# h, d
1：取 1ml LIF 移到15ml 灭菌的tube4 Q$ y. _' V3 X; F) z  o! X4 C
2：用 1ml  PBS （0.22um过滤的）冲洗LIF 小瓶（小心不要把PBS洒出来）；- e' s1 R- U8 i: B
3：将冲洗的PBS 移到15ml 灭菌的tube；
# u1 m7 m- w* J4：将步骤2-3 重复3次；( x# ^$ Q2 z, e6 |3 r! f/ e
5：将15ml 灭菌的tube定溶到10ml，封口并混均；（直接添加6mlPBS有可能不够）/ W$ j/ I; R0 `  T5 |
此操作中，15ml 灭菌的tube最好是 10ml定溶瓶。
. t1 L0 q7 ^; L& w( H* i$ ?$ K. r6：将0.5ml LIF 稀释液 装入1.5ml离心管（灭菌）；$ [/ s7 R, m( E/ n& }( ]. \
7：用parafilm 封口，标签，保存（原保存温度）。* \# B1 A% b3 k2 ^: l" g$ n0 Z
每配制500ml培养液时 添加一管（稀释的0.5ml LIF）。
# x; k/ ?; y+ i% i此方法一般适用于配制培养液，或大容量的（100-1000ml）稀释。; V/ d* y/ |/ e7 N1 g
方法二
6 ~* ^! ]3 c' S$ n% e3 l1：取450ul PBS 移到1.5ml离心管（灭菌）；( s) }$ G6 q7 D# z. }- _& g
2：取50ul LIF原液 移入到装有450ul PBS 的1.5ml离心管（灭菌）；  S3 O) A$ E1 ?; f% y
3：封口，摇均，标签， 保存。
5 {) o( _" q5 ~% E此方法适用
# N( P( H7 ]3 }( d7 L# W注意：必须封口，贴标签；操作要在洁净工作台。% G( o9 N% y6 i, y4 q+ B" V8 j
原理: 1ml（20*50ul） 可配 10L（20*500ml）培养液， 因此50ul原液可配置500ml培养液 。

qgjin

对了，使用时，可以用小型离心机离心一下，使贴在盖上的液滴滑入1.5ml离心管底部！！切记！！！