LIF应该如何稀释呢？10-7次方的

上海过客

LIF应该如何稀释呢？10-7次方的5 r0 z4 V/ b. b0 b. }: f5 i2 l4 B
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买了够配10升培养基的LIF应该如何稀释呢？: J) j( w+ U( B9 @( a9 I/ E* v
6 z+ b8 F- z- f. C6 a) b
想把它小量分装了 。  250ML 或者 500ML的 量 。9 N4 o; l0 ]2 f0 v. Q, f7 N5 q
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1ML 的母液用着感觉 不好  ，浓度降一点 ，分装一下 。
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做过的 ，请不吝赐教

周会

我买的是10-6次方的 ，不稀释直接用，每次加千分之一！

wyannb

我买的直接就是10六次方Iu的，用多少加多少，这个在四度保存也用不着分装啊。要是-20的话分装还可以。

上海过客

10-7 的 价格 便宜啊 。

tianangelt

回复 4# 上海过客 & t& A- o6 c/ R
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# p; U8 v& V, B
    您好，请问您用LIF是用来养干细胞的吗？我也在做，想和您交流一下。

hcoohboy

我买的是Chemicon公司的，四度保存，不需要分装，除非很多人用，每人分一支

上海过客

回复  上海过客
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) H0 ?& j, C' N6 L) C. T
5 V! u; D2 {5 ~9 T1 i/ w) @- _    您好，请问您用LIF是用来养干细胞的吗？我也在做，想和您交流一下。
0 N+ w3 @: h, W  }, s# h; atianangelt 发表于 2010-5-5 10:15

1 B! R1 S5 t- s( w  s1 ~- H3 |0 H0 ^$ Q  n3 I/ T
是培养 干细胞的 。

上海过客

10-7 的包装 盖子比较讨厌 ，不是螺旋盖，好像胶头总会有一些溶液，看着挺可惜的。
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: |! D4 n, E7 ]# D所以  想分装一下  扩大一下体积 ，损耗小一点

qgjin

: j2 u& l8 E: k3 }- r

0 c( |7 t9 A. \9 R1ml稀释成10L？   你先看看标签， 是不是有PBS稀释的；要是是 请如下操作；& x6 K+ e0 |7 l4 q- Z  E
1：取 1ml LIF 移到15ml 灭菌的tube
7 }( Z2 g0 \. I0 g" E* j0 q2：用 1ml  PBS （0.22um过滤的）冲洗LIF 小瓶（小心不要把PBS洒出来）；, b, q# p. b1 L* p; I
3：将冲洗的PBS 移到15ml 灭菌的tube；" k  L3 m( M1 c" P% y( l" {) u$ C
4：将步骤2-3 重复3次；
% ~4 f/ O) z6 }& {5：将15ml 灭菌的tube定溶到10ml，封口并混均；（直接添加6mlPBS有可能不够）
  U4 \' h2 P' w, V/ y7 n2 B, Z* m此操作中，15ml 灭菌的tube最好是 10ml定溶瓶。
& i) U2 O* k) Y5 t6：将0.5ml LIF 稀释液 装入1.5ml离心管（灭菌）；
9 H' b: c% j3 L3 n$ W7：用parafilm 封口，标签，保存（原保存温度）。+ K; @; w& V+ a
每配制500ml培养液时 添加一管（稀释的0.5ml LIF）。
9 [; X7 _! L9 y/ e此方法一般适用于配制培养液，或大容量的（100-1000ml）稀释。
7 T5 D/ L, x' J' E2 s7 ~方法二: l' `. I) A2 p7 M
1：取450ul PBS 移到1.5ml离心管（灭菌）；
. e- c1 e+ t+ A% N/ D7 p2：取50ul LIF原液 移入到装有450ul PBS 的1.5ml离心管（灭菌）；$ Y2 K1 s7 s+ J% r
3：封口，摇均，标签， 保存。
4 v8 L0 j0 T: j* Q& R* L此方法适用
! E3 R+ t8 q2 [3 q: g4 Z( Y7 {0 S注意：必须封口，贴标签；操作要在洁净工作台。
) e6 p/ w3 F6 t2 ^原理: 1ml（20*50ul） 可配 10L（20*500ml）培养液， 因此50ul原液可配置500ml培养液 。

qgjin

对了，使用时，可以用小型离心机离心一下，使贴在盖上的液滴滑入1.5ml离心管底部！！切记！！！