LIF应该如何稀释呢？10-7次方的

上海过客

LIF应该如何稀释呢？10-7次方的
  C; h: i; _! F5 o' U# w# I0 I
. u3 x, d& R0 _4 s5 m: j: S& K买了够配10升培养基的LIF应该如何稀释呢？
7 O+ Z) u0 Y; g" C8 U- Z1 W  j# N8 [, H! [6 [' E# z  V) u7 T
想把它小量分装了 。  250ML 或者 500ML的 量 。0 S$ s" C0 T. u( @* I

* }8 q' Q* q# \9 k/ j1ML 的母液用着感觉 不好  ，浓度降一点 ，分装一下 。
0 R) X+ M- d1 `# @( r
, J* z7 V" u4 t做过的 ，请不吝赐教

周会

我买的是10-6次方的 ，不稀释直接用，每次加千分之一！

wyannb

我买的直接就是10六次方Iu的，用多少加多少，这个在四度保存也用不着分装啊。要是-20的话分装还可以。

上海过客

10-7 的 价格 便宜啊 。

tianangelt

回复 4# 上海过客 8 B0 K: C/ h  D4 X+ S

; E: w1 [  @# P' n+ m7 [6 P" R
& y3 U+ D0 }9 `8 O1 x, g$ o/ |    您好，请问您用LIF是用来养干细胞的吗？我也在做，想和您交流一下。

hcoohboy

我买的是Chemicon公司的，四度保存，不需要分装，除非很多人用，每人分一支

上海过客

回复  上海过客
- i; |/ V- ]& _( u, M
- x; c" i$ n& u9 i  w' g: Q* a0 [& S  O+ ^( N" V* a* h
    您好，请问您用LIF是用来养干细胞的吗？我也在做，想和您交流一下。; M, X) f& B( ?8 U
tianangelt 发表于 2010-5-5 10:15

- O3 z4 Z  B: R$ |8 [' N5 M; r7 w( [9 m, a' D
是培养 干细胞的 。

上海过客

10-7 的包装 盖子比较讨厌 ，不是螺旋盖，好像胶头总会有一些溶液，看着挺可惜的。
' `( h7 f' i) H& f8 n* D/ B
2 r: ^- ~) K" T5 g* J* j所以  想分装一下  扩大一下体积 ，损耗小一点

qgjin

; d* _3 e1 O& ]7 W6 f
& V' r6 p0 t' y& z
1ml稀释成10L？   你先看看标签， 是不是有PBS稀释的；要是是 请如下操作；
2 j& ~6 E& F$ R% ^% d$ r1：取 1ml LIF 移到15ml 灭菌的tube
0 y, X% O% @4 F. n2：用 1ml  PBS （0.22um过滤的）冲洗LIF 小瓶（小心不要把PBS洒出来）；: R8 `5 o+ z' B; {7 M) e# _: C$ N. U
3：将冲洗的PBS 移到15ml 灭菌的tube；
* {! N1 J% }8 A9 D4：将步骤2-3 重复3次；
9 P* ^3 ^" w( l) Q7 A7 u5 x  Y' a5：将15ml 灭菌的tube定溶到10ml，封口并混均；（直接添加6mlPBS有可能不够）
3 I7 u' S9 Z- ~: L6 r此操作中，15ml 灭菌的tube最好是 10ml定溶瓶。/ h  }. ^6 N- n
6：将0.5ml LIF 稀释液 装入1.5ml离心管（灭菌）；
# E: s' N9 G8 k" t) ?& T7：用parafilm 封口，标签，保存（原保存温度）。
! Q1 h8 p+ [! w) k5 O每配制500ml培养液时 添加一管（稀释的0.5ml LIF）。" o: X& {) P5 @6 c: i. B( \
此方法一般适用于配制培养液，或大容量的（100-1000ml）稀释。
1 R# B% {6 v# B  z方法二, g1 _5 N& b5 @
1：取450ul PBS 移到1.5ml离心管（灭菌）；/ X2 k, ~( C/ D! g% N& l
2：取50ul LIF原液 移入到装有450ul PBS 的1.5ml离心管（灭菌）；1 a3 H' w* ^( X3 ]. x& T
3：封口，摇均，标签， 保存。& j' l; W+ n1 q8 X% u& z
此方法适用0 h" T/ `2 c  J) Q
注意：必须封口，贴标签；操作要在洁净工作台。
9 i# `6 P% t: [7 K原理: 1ml（20*50ul） 可配 10L（20*500ml）培养液， 因此50ul原液可配置500ml培养液 。

qgjin

对了，使用时，可以用小型离心机离心一下，使贴在盖上的液滴滑入1.5ml离心管底部！！切记！！！