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iPS诱导过程中感染效率很低的问题(附图)   [复制链接]

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楼主
发表于 2010-5-28 09:01 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 细胞海洋 于 2010-5-28 10:09 编辑 % q: A; \) C$ ?& [1 Q" Y9 ^. ^

7 Y: z, _: q% A  E6 l4 o5 I我用pMX-GFP载体转染Plat E后荧光表达还是很强的,但是48小时候收病毒感染MEF细胞却看不到荧光,或者荧光很弱。开始以为是plat E或者polybrene的问题,后来将这些都换了一批新的,但仍然效果不好。请大家帮忙分析一下到底什么原因导致感染效率低下。附上两张图片:转染后24h的plat E和感染后72h的MEF.
( m  K% t3 }# e! v( g! O( }# D( c  J3 J) c# e; }9 v9 f
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沙发
发表于 2010-5-28 10:32 |显示全部帖子
病毒滴度我没测,我是直接收集上清感染mef细胞。我就觉得奇怪,为什么转染效率还可以而感染很差,如果真是病毒滴度太低,那么包装环节出什么问题了吗?我是按protocol标准操作啊!/ ^2 K8 u/ n1 Z
   pMX-GFP在这里只是做一个阳性对照,观察转染和感染过程有没有问题。对于那四个因子,是分别包装的。现在对照都有问题,四因子感染当然没法做。
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