细胞最近不生长请大虾们给指教一下！

sxjcsq2010

我现在培养的羊膜间充质干细胞，采用二步酶消化法，培养基用的DF12，10%FBS，20ug/ml bFGF,10ng/ml L-G 在三四月份的时候还培养出来一批，一直能传到十几代，可是近来再做样，细胞基本不长，并且在第一天做样完毕后，第二天有一部分细胞帖壁，但是明显细胞呈现老化状态，半量换液后，第三天往后，细胞就开始哗哗的见上帝了。不知道问题出在什么地方，请大虾们给指教一下！

sxjcsq2010

我们实验室人多，因子用的一直都是新的；不太可能是细胞抑制吧，细胞抑制貌似是细胞接触抑制吧，可是细胞密度较小，只能达到50%左右。

sxjcsq2010

上帝啊，我今天又做样了，……问题在哪里？……希望它明天能开开心的长进来吧！

sxjcsq2010

回复 6# 圣牛
$ X5 `% ~; m4 n& ^5 E) C噢，谢谢你！细胞因子是新的，没有过期。近来又做一批样，效果还行。可能是天气渐热，酶在室温消化的时间不像冬天那样时间长了。