请教：有关神经干细胞条件培养基的问题

dingyx2009

刚开始做干细胞的实验，看了一些文献，培养神经干细胞的无血清培养基，有人用：DF12+N2 1%+BFGF20ng/ml+EGF20ng/ml；: K6 V% q$ O2 @% T! [- M5 C+ K( P
或DF12+ B27 2%+BFGF20ng/ml+EGF20ng/ml；
- s2 v6 @7 |4 {3 M% H0 Q或DF12+N2 1%＋B27 1%+BFGF20ng/ml+EGF20ng/ml。
& B  G8 F( B) [  }1 K
1 m6 u4 u  J9 S, j. p就特别想知道对N2和或B27的选择依据是什么？它们在神经干细胞的生长发育过程中所扮演的角色有什么异同？

待鹤

参考这篇文献 该文献比较了几种不同的基础培养基和辅剂的组合。发现在Neuralbasal+B27或者DMEM/F12+BIT9500中细胞扩增最好。3 V0 e1 A  i. ?, ?1 Q2 M$ k. s' m

xfyang2007123

有文献说，B27包含N2的所有成分，所以只用B27即可。而还有文献说原代培养用B27，传代用N2较好。

dingyx2009

回复 2# 待鹤
+ M' s; s2 U# q6 L
, _4 A4 O/ f- W6 H+ ]/ J. N5 V) |3 C万分感谢，很不错的一篇文献。

dingyx2009

回复 3# xfyang2007123
2 j) g% Y" Z0 Z
0 M6 a0 g: n( j  {0 o当时N2和B27都订了，试试你说的方法。学习了。

cortex

B27成份比N2复杂，B27包括：Biotin，L-Carnitine，Cholesterol，Corticosterone，Ethanolamine，D(+)-Galactose，Glutathione (reduced)，Lecithin，Linoleic Acid，nolenic Acid，Phosphatidylcholin，Progesterone，Putrescine，Retinol，Retinyl Acetate，Sodium Selenite，T3 (Triodo-I-Thyronine)，DL-α-Trocopherol (Vitamin E)，DL-α-Trocopherol Acetate，Proteins:Albumin, bovine，Catalase，Insulin，Superoxide Dismutase，Transferrin。
" ~/ C) D2 D: ]) u, _! h; a主要用途：血清替代品；海马神经元生长；多种CNS神经元；神经细胞基础培养基的添加剂。添加后，神经干细胞主要向脊髓神经细胞方向分化。
6 Q; b+ ]) c$ `N2成份相对简单，Human Transferrin (holo)  500.00
! r8 M2 H. q/ ?                       Insulin (Bovine)                500.00' Y6 H+ l& ~: p; R
                       Progesterone                    0.63! n( C3 A  B7 B1 U9 H
                       Putrescine                         1611.006 Y9 E0 N' S, P* K4 ~& n
                       Sodium Selenite                 0.52
/ _, E; b0 `, J7 N% s看你养细胞的目的，最好添加N2，尽量不添加B27。

meirongwan

B27在神经干细胞诱导前三天用用DMEM/F12作培养基很便宜

dingyx2009

回复 6# cortex 4 D1 S' s: N: ~# M1 z7 X3 p

2 Q' b) a/ [4 w8 @: ]7 W' m* P  y近来培养神经干细胞即用B27，又用N2。在相差显微镜下观察，发现和以前单纯用B27培养的神经干细胞还是有区别的，B27培养的干细胞背景干净，细胞大小相对均一，而加入N2培养的干细胞，总感觉有很多的单细胞和细胞碎片。可能在我的实验我还是倾向于单用B27。

cortex

当然，这个得根据你得实验。这个很好理解，B27的成份明显比N2复杂。这不过有报道称，经B27扩增后细胞的分化潜能会下降。所以这个你也得考虑。