请教：有关神经干细胞条件培养基的问题

dingyx2009

刚开始做干细胞的实验，看了一些文献，培养神经干细胞的无血清培养基，有人用：DF12+N2 1%+BFGF20ng/ml+EGF20ng/ml；
; ^0 m& o8 |! x+ }- D+ N3 J8 F* `或DF12+ B27 2%+BFGF20ng/ml+EGF20ng/ml；' V: N( H1 y$ x% A
或DF12+N2 1%＋B27 1%+BFGF20ng/ml+EGF20ng/ml。! X. h& R* [  |/ O7 k
/ d" L4 z+ f0 J! {
就特别想知道对N2和或B27的选择依据是什么？它们在神经干细胞的生长发育过程中所扮演的角色有什么异同？

待鹤

参考这篇文献 该文献比较了几种不同的基础培养基和辅剂的组合。发现在Neuralbasal+B27或者DMEM/F12+BIT9500中细胞扩增最好。
$ l4 Z2 ?, H+ ]. n- c% @  V

xfyang2007123

有文献说，B27包含N2的所有成分，所以只用B27即可。而还有文献说原代培养用B27，传代用N2较好。

dingyx2009

回复 2# 待鹤 ' @' c+ W. ]. Q
$ W  a" F  G/ V2 ~& F
万分感谢，很不错的一篇文献。

dingyx2009

回复 3# xfyang2007123
* C4 D& i: Y  w+ T$ V) H6 ~' S* z3 ~1 `% p* n6 t4 z; p6 I
当时N2和B27都订了，试试你说的方法。学习了。

cortex

B27成份比N2复杂，B27包括：Biotin，L-Carnitine，Cholesterol，Corticosterone，Ethanolamine，D(+)-Galactose，Glutathione (reduced)，Lecithin，Linoleic Acid，nolenic Acid，Phosphatidylcholin，Progesterone，Putrescine，Retinol，Retinyl Acetate，Sodium Selenite，T3 (Triodo-I-Thyronine)，DL-α-Trocopherol (Vitamin E)，DL-α-Trocopherol Acetate，Proteins:Albumin, bovine，Catalase，Insulin，Superoxide Dismutase，Transferrin。
; M+ Y. {2 @0 p主要用途：血清替代品；海马神经元生长；多种CNS神经元；神经细胞基础培养基的添加剂。添加后，神经干细胞主要向脊髓神经细胞方向分化。
2 H0 ?+ M. L' e# nN2成份相对简单，Human Transferrin (holo)  500.00
5 o' s+ w* Y' g( c0 T# P. X+ q3 V                       Insulin (Bovine)                500.00
; I) F3 j8 c1 z0 U- Z  \5 T                       Progesterone                    0.63
+ R  k0 J- E0 I8 [$ u4 J% v; p                       Putrescine                         1611.00# h% i* V5 p. F/ Q, n
                       Sodium Selenite                 0.52
6 f+ K* h$ V6 `* ^3 B5 g看你养细胞的目的，最好添加N2，尽量不添加B27。

meirongwan

B27在神经干细胞诱导前三天用用DMEM/F12作培养基很便宜

dingyx2009

回复 6# cortex
+ r4 w! n2 s) d1 k/ |8 \' _* k
6 |* l( n( K: y6 N# p9 e近来培养神经干细胞即用B27，又用N2。在相差显微镜下观察，发现和以前单纯用B27培养的神经干细胞还是有区别的，B27培养的干细胞背景干净，细胞大小相对均一，而加入N2培养的干细胞，总感觉有很多的单细胞和细胞碎片。可能在我的实验我还是倾向于单用B27。

cortex

当然，这个得根据你得实验。这个很好理解，B27的成份明显比N2复杂。这不过有报道称，经B27扩增后细胞的分化潜能会下降。所以这个你也得考虑。