rhBMP2 纳米缓释系统的制备及其对骨髓间充质干细胞增殖和分化的影响

明日帝国

rhBMP2 纳米缓释系统的制备及其对骨髓间充质干细胞增殖和分化的影响
$ A- |) Y! \% D6 \! Q
8 Y8 U0 `( R. J6 }& A$ k陈发明1, 吴织芬1, 金岩2, 王勤涛1, 杜岩1, 王国芳1
0 @8 y5 b: M# J  }5 N2 J(1.第四军医大学口腔医学院牙周黏膜病科, 2.组织工程中心, 陕西西安710032)
  p1 t- o. R( T8 }- L4 X3 S5 m1 @$ `[摘要] 目的: 制备甲基丙烯酸缩水甘油酯右旋糖酐( dex- GMA) 载重组人骨形态发生蛋白2 (rhBMP2)凝胶纳米微球
5 {1 D4 H+ p1 ]1 ^' p(NPs) 缓释系统, 检测其理化及生物学特性。方法: 采用改良乳化溶液聚合法, 制备rhBMP2 纳米微球( rhBMP2- dex-
( P  X: t1 `6 pNPs) ; 观察其形态、粒径与稳定性, 检测其载药、释药特征; 采用体外细胞培养技术, 将rhBMP2- dex- NPs 和兔骨髓间5 o) T" g+ s2 X! w; j1 W
充质干细胞一起培养, MTT 法检测其对细胞增殖状况的影响, 碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒检测细胞ALP 活性, 以& z; N2 H5 q6 i% ], }  y
反应rhBMP2- dex- NPs 对其分化状况的影响, 并与单纯rhBMP2 的作用进行比较; 实验按照培养液中所含成分不同分$ W. @, E/ F( n* S( S7 i
为4 组: 培养液中加入单纯rhBMP2(A 组) 、加入rhBMP2- dex- NPs(B 组) 、加入空白NPs(C 组) 和对照组(D 组) , 其中6 q2 R6 L0 O' P9 [
A、B 2 组均分别按照rhBMP2 的不同量设置100 μg/L、200 μg/L、400 μg/L 3 个浓度组, 采用SPSS 10.0 对结果进行统) i, L5 U( j4 |- O' ^# u
计学分析。结果: rhBMP2- dex- NPs 大小均匀, 粒径分析表明, 80%的纳米球粒径在20nm 左右, 包封率高达83%, 80%8 F" r+ g. a4 L% ~. Q! j
的rhBMP2 在前12d 释放; 其具有良好的生物学活性, 能显著促进骨髓间充质干细胞(BMSCs) 的增殖和分化, 效应高0 b1 w2 {& M4 ^  n0 F3 N
于单纯施加rhBMP2 的效应(P<0.01)。rhBMP2- dex- NPs 与BMSCs 共培养3d 内, 反应BMSCs 增殖和分化的OD 值与A
1 e" y& Z1 o2 l) g组无显著差异( P>0.05) , 但显著高于C、D 组(P<0.01); 3d 后, rhBMP2- dex- NPs 对细胞增殖和分化的促进作用较单纯
" ^9 k# {  f, VrhBMP2 明显加快; 5～7d 后, A、B 组差异具有显著性( P<0.01) ; 12d 左右, B 组细胞仍然有较强的增殖与分化能力, 与# \2 A1 `5 d$ W
其他3 组有非常显著差异( P<0.001) , 而此时A、C、D 组间差异已无统计学意义( P>0.05) 。结论: 所制备的rhBMP2-
1 k, V( O& p3 l+ b2 Wdex- NPs 形态良好、包封率高, 理化与生物学性能稳定, 可以达到对生长因子的良好缓释, 比单纯rhBMP2 对BMSCs7 n; E4 A2 [+ M8 J/ h# P
有更为明显的生物学效应, 可以持续促进其增殖与分化达10d 以上, 在组织工程领域有着广阔的应用前景。
# C% q' a+ B+ C" C[关键词] 骨形态发生蛋白; 右旋糖酐; 纳米微球; 缓释; 骨髓间充质干细胞
* z: Y2 j$ M6 b; y% {2 d[中图分类号] R318.08 [文献标识码] A6 ]4 ^  w. M6 V9 p; V" N
Pr epar ation and proper ty of r ecombinant human bone morphogenetic protein - 2 loaded hydrogel nanospher es
: O- w. ?" G0 L( N: `% P. {and their biological effects on the prolifer ation and differ entiation of bone mesenchymal stem cells CHEN Fa -
; W2 _/ Q' {$ L3 c% x. jming1, WU Zhi - fen1, JIN Yan2, Wang Qin - tao1, DU Yan1, WANG Guo- fang1. (1. Department of Periodontology and
; n5 P- U. @0 G  PMucosal Diseases, 2. Department of Tissue Engineering Center, College of Stomatology, Forth Military Medical University.$ `: q' p* ^1 e2 |0 D7 m, D
Xi'an 710032, Shanxi Province, China )3 Y. K, ^7 f7 k4 E: f9 A% |2 |
[Abstr act] PURPOSE: To prepare and study the recombinant human bone morphogenetic protein- 2 loaded dextranbased2 [4 w: i5 T9 e( o7 g, D! O
hydrogel nanospheres (rhBMP2- dex- NPs) sustained release system, and to evaluate its biological effects on cultured  z' z5 [5 O" y$ t/ k
rabbit bone mesenchymal stem cells(BMSCs) . METHODS: The rhBMP2- dex- NPs were prepared by improved emulsion2 _6 ^  x, q* C9 O) d5 d2 z; _7 P
polymerization method. Their morphology, size and size distribution, encapsulated ratio and stability were assessed by
! N$ E% \& r. h0 d3 jroutine procedure. Dynamic dialysis method was used to determine the release characteristics of rhBMP2- dex- NPs in vitro.3 A0 D& U2 `7 `
Cell culture technique and MTT colorimetric assay were used to evaluate the proliferation and differentiation of the* k; o$ |! {& d9 N+ W5 @
5 J$ X+ Y# s( }4 A
附件为全文，请大家支持一下 回复本贴就可以下载了8 a2 u  K& P- [* C
0 N) ~" G( `! O/ Y% p" U8 P; |6 Y
[hide][/hide]

flydragon5

看看

falconli

一定要好好学习一下

april

看看

fish619

学习下子

missyoudad

学习下

可怜的孩子

不错，金岩的

inputbox88

看看

wshzhoum

好好学习了~