有关猪的IPS问题

chenxin

有没有人关注猪的腺病毒或载体进行ips的问题，希望找到志同道合的人，讨论一下实验中遇到的问题

ambassador

看到猪，感兴趣进来的~我们还没做iPS，你可以讲讲你们是怎么做的？
7 j3 p) g4 ~# Y' ~8 J( a" k% J: z7 b
你们做iPS的目的是什么呢？作育种吗？

stonelee2050

我打算9月份开始做呢，正在查文献学技术了。关注关注！

大猪小猪落玉盘

目前国内做猪的IPS细胞系的主要有广州医药与健康研究院和上海肖磊那里，还有深圳华大基因、北京畜牧研究所、南开大学、中国科技大学等等，可以多联系交流，共同提高！！

cicadacjk

建议你不要选这个题
2 m# n  b. e# l( L0 r目前连逆转录病毒和慢病毒，都做不出来真正的猪iPS（三篇文章也好，这次旧金山的大会也好，都没有见到外源不沉默的）。* ?' B4 R9 |' b  v5 A
就算你铁了心要试，也不建议你做腺病毒，小鼠腺病毒文章仅有一篇。从感染效率讲是不低，但重复性是很差的，应当是因为病毒感染导致细胞内部产生不利于重编程的变化。

上海过客

建议你不要选这个题' d' R/ C. _. |+ |5 X- J0 A
目前连逆转录病毒和慢病毒，都做不出来真正的猪iPS（三篇文章也好，这次旧金山的大会也 ...
' r/ N% H6 ^% V! b* ]- D% rcicadacjk 发表于 2010-7-3 14:50

/ ?. l8 T+ l6 Q" ~0 m& s: X6 X
' n) w& N) x/ l% `
你这么一讲 ，我到觉得  “猪的 iPS 为什么做不出来” ，倒是一个很好的课题啊 。9 q! i4 ]1 k: }9 b, |% x

& W) ~2 v; q$ Y  m人的 都可以了 ，猴子的也可以了 。但是猪的得不到 。  细微的 问题是什么呢 ？
7 v% M6 j! v$ r3 _: b1 D  M% y; ?) ~, C
1 信号通路的问题吗 ？% @+ Y) G4 c, q$ Q; W
2  培养基
0 F" K2 Q; a% G% ~ 3  转基因 的 基因问题  ，不被甲基化识别 ？

cicadacjk

个人观点' D2 \) O9 c% B+ A7 K) q

- }# E1 Z+ n* m$ Q* _1 E培养条件尚且无法支持猪的胚胎干细胞状态
5 \" n7 X$ \+ U: w" j( u" D7 C9 P' z0 c; {1 Y1 d: u
例子：大鼠的ES做了20年1 }; S9 r. P- q, V% Z) W. [2 R
人的ES状态还没被广泛认可

上海过客

最近有类似 小鼠ES细胞培养形态的Human  ES  细胞培养文章 。可以借鉴一下吧 ？
9 q! X$ k% P" k1 n* L
7 d; d- ?% m. x( f: w
6 j" k$ S3 P' q( ~: f5 R3 ]不知道 猴子的 ＥＳ　细胞　能不能得到嵌合体　？　　

qizhi502

回复 5# cicadacjk
6 O' H: N5 u& h- b, |+ p7 A
! Q4 Z1 N8 r5 u$ V" Q# T9 S% N* F: x3 T
   1 逆转录病毒在多能性细胞中会沉默，人的和小鼠的都可以，而猪为什么不沉默呢？这个问题确实比较困惑人，如果条件诱导（cre-loxp），是不是外源沉默细胞就传不下去了？* y3 P7 K2 q' z5 E
   2 猪的不出来是因为还没有真正ES 出来，连个对照都没有。不过最近出来类小鼠的HES 方法确实值得借鉴

cicadacjk

对于8楼9楼的问题
" l7 Z- w" q- ^& r5 h我的观点是
- j8 g6 c- F6 Y0 g1. 类小鼠的HES是依靠过表达5个因子维持的，但我们不知道其天然状态到底是跟小鼠一样，还是一种区别于当前mES和hES之外的一种状态。: e) I/ o# v# B8 Q) f8 ?
2. 在猪里面尝试得到这种细胞也很有趣，内源是全部开放的，只是在这个基础上组成型表达几个因子。目前尚无类似报道。
' w2 ^9 D7 D! m, x8 i3. 猴的胚胎操作还比较困难，但我自己推测现在的猴iPS是无法做出嵌合猴的。
9 e+ F) A, x: q7 d( \1 w. `; ?4. 逆转录病毒沉默是重编程最后期的事件之一，这只能证明所有尝试都还没有进入最后一个阶段。