CSCs的培养基成分

zhalang1000

各位老师，各位同仁，能说说你们肿瘤干细胞培养基的详细成分和含量吗？

amosummer

培养基配制每200ml无血清 DMEM/HamSF12培养基中加入5mg 牛胰岛素、20mg人转铁蛋白、 1.2g右旋葡萄糖、 1.038μg亚硒酸钠、0.8g牛血清白蛋白、l.265mg孕酮、2 mg腐胺、4mgEFG、2mgbFGF、0.8mg肝素和2ml 1%青链霉素
( B) A1 C" X: X

ziyan831008

细胞不同应该存在一定的差异，细胞因子应该有所不同' W& @8 P* |" c( O+ I, C- y0 }
DMEM培养基、10ng/μl bFGF、10ng/μl N2、 10ng/μl PDGF 、1%青链霉素
- U4 A- E) @1 C* v

purehugh

. n, E9 l/ }* z) I8 f

2 g5 B8 I, I8 l5 Q0 E) b4 p有一种配方简称KM medium
% y# Y; `( b7 i+ Q2 o% w
7 `2 A! X  B" b1 M4 KDMEM/F12
, W: Z3 F2 l$ `& I3 W* n20ng/ml EGF 2 L; y: a6 Y6 w/ W9 h' u8 q# s
5ug/ml insulin 2 @4 A2 ^" P- H5 Z
0.1uM dexamethasone
9 U, T( M* [/ q& i* r10ug/ml iron-saturated transferrin
+ n% D4 ?5 Y3 r* f4.4mM nicotinamide* F  M( B! p" |0 \; ^0 b1 i  }
0.2% BSA (Sigma)! G) d  N% E1 i; g+ U
10uM 2-mercaptoethanol
  ~% C' B$ m) g4 q0 H2 {7.6uM/l free fatty acid,8 T0 m) I& s0 N! M7 i# ]
1mM glutamine 0 w' a5 z# t4 b
1uM CuSO4
* P* g7 M0 U; U30nM H2SeO3
/ b9 O* y7 T9 J; m( o6 u$ E6 Q1% P/S7 u2 H' ?( W, J$ j7 R( E: Q
  H, P& a6 Z  k5 G; W* T
我自己又多添加了 20ng/ml的bFGF

咔啦

可能用得上

amosummer

回复 purehugh 的帖子
9 L+ L; t1 k# J" B
; v/ h" I7 {) J, T7 I请问的EGF和bFGF配置的时候需要稀释吗？还是直接加入粉末呢？如果稀释用什么稀释呢？稀释多少倍，谢谢!

pzypig

回复 amosummer 的帖子
/ b# x0 h- r$ H& }$ w, a
/ g3 a0 d! J0 l3 C( V请问您写的培养基是自己配置的还是直接购买的呢，是不是适用所有肿瘤干细胞

pzypig

回复 purehugh 的帖子$ t! ?8 j9 [, q7 c

$ u5 X! n+ v( f) ]/ a" f请问您写的培养基是自己配制的还是直接购买的呢，哪个公司的，是不是适用所有肿瘤干细胞

purehugh

回复 pzypig 的帖子
8 S( c* F7 T- A$ q' s; ^) a# Q' K* k! j9 m# e& Y
自己配制的。! u# Y# \; {1 x- I( Y( t
DEME/F12从Invitrogen买的。  _9 }7 S7 K- r* v5 I
EGF，bFGF从PREPROTEHCH买的。
* j2 K' Q- @& I( u* I/ }其他都是从Sigma买的。

purehugh

回复 amosummer 的帖子
3 a% C5 \- \; _5 u$ s5 W
3 `8 g( i0 |7 EEGF和bFGF我是从PreProTech公司买的，感觉性价比很不错，还经常送一些小礼物。
, F( ^9 R  ~2 l: i刚开始配制是我是按照说明说用水溶解的。: r" p! d. D; _, f
后来我改为用DMEM/F12溶解。因为我所有的培养基都是以DMEM/F12作为基础的。1 d& o% ]% }  Z, {* v. |
我个人感觉，DMEM/F12溶解后分装效果很不错。