CSCs的培养基成分

zhalang1000

各位老师，各位同仁，能说说你们肿瘤干细胞培养基的详细成分和含量吗？

amosummer

培养基配制每200ml无血清 DMEM/HamSF12培养基中加入5mg 牛胰岛素、20mg人转铁蛋白、 1.2g右旋葡萄糖、 1.038μg亚硒酸钠、0.8g牛血清白蛋白、l.265mg孕酮、2 mg腐胺、4mgEFG、2mgbFGF、0.8mg肝素和2ml 1%青链霉素
$ d8 t7 a3 m8 K% |( h  C% H& }

ziyan831008

细胞不同应该存在一定的差异，细胞因子应该有所不同/ _) Q1 m" W) k" f- K7 t
DMEM培养基、10ng/μl bFGF、10ng/μl N2、 10ng/μl PDGF 、1%青链霉素* v. f, w% f/ N& U! i2 `

purehugh

4 j1 p! Y9 E; v
" N! m5 G0 e# Y, `' k( N" K有一种配方简称KM medium; n, T! J* j6 D
" p( h( S5 i! Z5 p# f: c$ L
DMEM/F12
6 S8 F. t0 k3 ]. ?9 b) o# o' m0 ^0 [20ng/ml EGF / ?! w* B: u7 d& t) R, s
5ug/ml insulin 6 D6 m% q' n6 c  \* I$ _) q
0.1uM dexamethasone # {5 @. R" A& X. T2 }
10ug/ml iron-saturated transferrin
" u/ }6 R! h4 s" b4.4mM nicotinamide5 `1 Z8 I, i% j9 V
0.2% BSA (Sigma)
3 e5 ?* l7 b$ T2 @+ k( ?; t3 p. F10uM 2-mercaptoethanol . k3 d3 W) D- d% x8 o
7.6uM/l free fatty acid,
& M% I  j- s* V1mM glutamine . I' F+ Z* t5 ^( y  U
1uM CuSO4* u- r; S! Q2 q1 W% {
30nM H2SeO3
0 R4 e( R# x4 W1 k" z& b1% P/S2 D, d9 w0 X  P
. K3 t9 |1 ~/ v; l, b" q2 S
我自己又多添加了 20ng/ml的bFGF

咔啦

可能用得上

amosummer

回复 purehugh 的帖子
2 z' ^1 b5 V* |  @. \% @# o" Q3 p! P# \+ r3 M
请问的EGF和bFGF配置的时候需要稀释吗？还是直接加入粉末呢？如果稀释用什么稀释呢？稀释多少倍，谢谢!

pzypig

回复 amosummer 的帖子3 h  ]& |! ^" t0 W! z( K$ ]  r" R
0 V/ i/ p3 E: b. u& `* [3 |
请问您写的培养基是自己配置的还是直接购买的呢，是不是适用所有肿瘤干细胞

pzypig

回复 purehugh 的帖子1 z/ G6 d, O1 p! r

0 B5 D: ]! K. k2 c% ~请问您写的培养基是自己配制的还是直接购买的呢，哪个公司的，是不是适用所有肿瘤干细胞

purehugh

回复 pzypig 的帖子
- z6 q! A* G7 v. V+ n' H' z/ @# f( \% D- ^$ @
自己配制的。+ W# @9 J7 V$ ^
DEME/F12从Invitrogen买的。
* N' M. L/ i/ m  F0 ZEGF，bFGF从PREPROTEHCH买的。
1 }7 e0 m7 J& K3 c3 L3 j其他都是从Sigma买的。

purehugh

回复 amosummer 的帖子
2 R7 y$ C6 E: t) ]4 [! X* i0 U5 |7 l1 y, i- ?
EGF和bFGF我是从PreProTech公司买的，感觉性价比很不错，还经常送一些小礼物。
/ T8 o, h1 c3 `' T刚开始配制是我是按照说明说用水溶解的。: s1 Y# j$ Y/ k& X% b1 x
后来我改为用DMEM/F12溶解。因为我所有的培养基都是以DMEM/F12作为基础的。, S5 i, K6 s, @% s2 ?
我个人感觉，DMEM/F12溶解后分装效果很不错。