CSCs的培养基成分

zhalang1000

各位老师，各位同仁，能说说你们肿瘤干细胞培养基的详细成分和含量吗？

amosummer

培养基配制每200ml无血清 DMEM/HamSF12培养基中加入5mg 牛胰岛素、20mg人转铁蛋白、 1.2g右旋葡萄糖、 1.038μg亚硒酸钠、0.8g牛血清白蛋白、l.265mg孕酮、2 mg腐胺、4mgEFG、2mgbFGF、0.8mg肝素和2ml 1%青链霉素
; Z6 y, J/ Z; Y) O

ziyan831008

细胞不同应该存在一定的差异，细胞因子应该有所不同9 h1 Q) \, h: |( U3 e
DMEM培养基、10ng/μl bFGF、10ng/μl N2、 10ng/μl PDGF 、1%青链霉素
. K* R- Y$ A- ~2 S- o8 ?

purehugh

3 q4 M! Y' h. z9 ]

# \* r  b, m. M- m  B有一种配方简称KM medium
& e! B  g# b& z7 G
0 k+ V: f3 _- f9 l. d7 b5 dDMEM/F12
. n1 q  ~) X9 ^20ng/ml EGF 5 B9 `) W# B" y7 i9 b. o
5ug/ml insulin
% S5 u7 Z+ r/ {! M: S5 k" }. c0.1uM dexamethasone % N* c" v1 U- r( N4 Y! [
10ug/ml iron-saturated transferrin# A, w# }+ u* m8 ~+ Q7 W
4.4mM nicotinamide
4 O. F7 K) v, G5 a; I' p0.2% BSA (Sigma)7 g* A9 ?9 I; o/ [$ `' C4 l
10uM 2-mercaptoethanol
/ W  C7 Y7 I( X7 e7.6uM/l free fatty acid,2 W9 r4 p' M0 q5 R# u" f" F6 f
1mM glutamine
5 q8 l4 C! F9 h% N1uM CuSO4+ w! h. X. D8 \9 ?
30nM H2SeO3
+ B5 A' n* e. B! G0 w1% P/S
: H  ], [1 U- J( g) w: t% m4 r$ Q& \: q/ M* d/ S+ ?
我自己又多添加了 20ng/ml的bFGF

咔啦

可能用得上

amosummer

回复 purehugh 的帖子* y0 h2 k' _- W6 Y- m$ k" E9 Y

1 `+ l* E( R( i" U# G4 p请问的EGF和bFGF配置的时候需要稀释吗？还是直接加入粉末呢？如果稀释用什么稀释呢？稀释多少倍，谢谢!

pzypig

回复 amosummer 的帖子, ?; [8 h0 B0 z; @& }& L% y

% B3 ]  V  O1 \请问您写的培养基是自己配置的还是直接购买的呢，是不是适用所有肿瘤干细胞

pzypig

回复 purehugh 的帖子4 `) \0 Q- N& c! ~9 H
$ v! v2 Z, B$ q) u  c* z* a8 o% K0 `
请问您写的培养基是自己配制的还是直接购买的呢，哪个公司的，是不是适用所有肿瘤干细胞

purehugh

回复 pzypig 的帖子
  R4 D; k* E& p2 g; H6 `2 a# V) B6 t$ r2 {( x) N1 u" q
自己配制的。
' P# }# H3 |9 {+ i7 XDEME/F12从Invitrogen买的。& X/ o$ i0 o' u$ L  a" m
EGF，bFGF从PREPROTEHCH买的。6 I: V8 Y5 ]) J8 w8 E% }' ^
其他都是从Sigma买的。

purehugh

回复 amosummer 的帖子+ i  Q2 s; h# S! [1 K* E

* P% c4 h+ M' A* sEGF和bFGF我是从PreProTech公司买的，感觉性价比很不错，还经常送一些小礼物。' F- \3 f! [6 b$ k
刚开始配制是我是按照说明说用水溶解的。. Y5 N7 C- s1 Z2 F; v' t$ _
后来我改为用DMEM/F12溶解。因为我所有的培养基都是以DMEM/F12作为基础的。$ X: u7 l. y& u1 X+ L" s' j
我个人感觉，DMEM/F12溶解后分装效果很不错。