CSCs的培养基成分

zhalang1000

各位老师，各位同仁，能说说你们肿瘤干细胞培养基的详细成分和含量吗？

shengxiaqq

回复 amosummer 的帖子5 k' a0 s: j2 ?5 _) \/ R% L/ r

4 j( |6 l, ?" E6 e肯定需要稀释啊，我就直接用培养干细胞的培养基稀释的，我稀释成的浓度是EGF 40ng/ml，FGF 40ng/ml。另外还有LIF 我稀释成10ng/ml。这个浓度得根据自己的细胞来

purehugh

回复 amosummer 的帖子) j& p/ j* d  ~" E, r
" `% z8 i6 J  z9 O% G2 M
EGF和bFGF我是从PreProTech公司买的，感觉性价比很不错，还经常送一些小礼物。; H& N  \  z' h; U
刚开始配制是我是按照说明说用水溶解的。
3 p& M" u; Z" i/ [后来我改为用DMEM/F12溶解。因为我所有的培养基都是以DMEM/F12作为基础的。
  j) ], \+ y( |9 A1 o% n, r- I我个人感觉，DMEM/F12溶解后分装效果很不错。

purehugh

回复 pzypig 的帖子' @" W4 k/ k. }' V. C

# V, ^1 f& I1 P# T3 s7 {7 I* n自己配制的。
3 U8 k- o' o* w; iDEME/F12从Invitrogen买的。
, y  b& Y( K4 _9 V4 r3 [" bEGF，bFGF从PREPROTEHCH买的。
; R/ p* T9 `% p# M1 L: W  J其他都是从Sigma买的。

pzypig

回复 purehugh 的帖子
3 P+ U9 P. L3 C9 s, m% ]2 \* c: U  Z9 X, m
请问您写的培养基是自己配制的还是直接购买的呢，哪个公司的，是不是适用所有肿瘤干细胞

pzypig

回复 amosummer 的帖子8 S6 _: q7 O6 }4 C. ^& Q) w2 [$ o/ @

3 I) S9 M  \3 w5 C  ]. J% v请问您写的培养基是自己配置的还是直接购买的呢，是不是适用所有肿瘤干细胞

amosummer

回复 purehugh 的帖子
# `& t" o9 ]( f; O
- a* D3 ?/ l9 X+ m+ l3 |1 k请问的EGF和bFGF配置的时候需要稀释吗？还是直接加入粉末呢？如果稀释用什么稀释呢？稀释多少倍，谢谢!

咔啦

可能用得上

purehugh

6 a% B3 N4 _" ]2 V/ [' C! j% @6 o8 M8 @  ?$ p& m
有一种配方简称KM medium% p) N0 E: @$ K+ f- ?- \
2 }2 Z1 Y4 M- k) b7 i# @
DMEM/F12
/ j5 {8 o+ F$ S$ l20ng/ml EGF 6 m/ i/ e9 [. ?2 r+ V2 v
5ug/ml insulin 0 Q% z$ R; @+ l8 M. s' V: Q
0.1uM dexamethasone ; L( B5 x0 ^, S  B
10ug/ml iron-saturated transferrin
0 o. Y& g! x7 `6 }; o4.4mM nicotinamide6 c! h8 s& S- _
0.2% BSA (Sigma)" B: L% Q; Y9 v. r+ r$ o" w# Y2 _
10uM 2-mercaptoethanol 6 c7 v# c% R/ b6 u( ^7 d
7.6uM/l free fatty acid,8 l: m# c. M3 b4 J5 `+ L" G
1mM glutamine
6 e  A" S' x' [7 G2 `' }1uM CuSO41 U0 m; U9 {. C  `2 I
30nM H2SeO34 c% O  Q% u  D
1% P/S* Q" m  W* Q7 ~/ o/ u% C
% r' `0 x5 ]" w
我自己又多添加了 20ng/ml的bFGF

ziyan831008

细胞不同应该存在一定的差异，细胞因子应该有所不同# i0 W, b* @# g/ B0 U
DMEM培养基、10ng/μl bFGF、10ng/μl N2、 10ng/μl PDGF 、1%青链霉素
" @0 K: Z5 o% U' D+ `