CSCs的培养基成分

zhalang1000

各位老师，各位同仁，能说说你们肿瘤干细胞培养基的详细成分和含量吗？

amosummer

培养基配制每200ml无血清 DMEM/HamSF12培养基中加入5mg 牛胰岛素、20mg人转铁蛋白、 1.2g右旋葡萄糖、 1.038μg亚硒酸钠、0.8g牛血清白蛋白、l.265mg孕酮、2 mg腐胺、4mgEFG、2mgbFGF、0.8mg肝素和2ml 1%青链霉素
- ^/ E* h1 `' Z* F- y/ @1 D9 B

ziyan831008

细胞不同应该存在一定的差异，细胞因子应该有所不同4 ~" C) C! L; T5 p* g$ j) Z
DMEM培养基、10ng/μl bFGF、10ng/μl N2、 10ng/μl PDGF 、1%青链霉素1 `" b! N5 K; m" w6 S# w

purehugh

2 p2 `! c% a' f$ E% O  l3 V" X4 J2 q8 Q8 U$ w! V- ~
有一种配方简称KM medium! L+ Z5 g) l, z. W
: ?- \5 {2 O8 G
DMEM/F12
( p2 ^% ^2 D. V. @- r7 o+ Y20ng/ml EGF
' K7 Q! X- L* C( M5ug/ml insulin $ ~; N( b' W; B! ^7 O) s
0.1uM dexamethasone $ x& a- A' `. M# w4 j
10ug/ml iron-saturated transferrin
# N1 w0 [. \/ f  ~4.4mM nicotinamide
, X+ l- O+ `5 z5 Y: Y0.2% BSA (Sigma)/ U0 H4 t7 c1 L! U) J$ I* g7 e
10uM 2-mercaptoethanol
2 z+ y# W/ `+ u/ o7.6uM/l free fatty acid,
! t) Q: d$ h" ?& \  \6 N' S1mM glutamine
2 ]3 w4 v8 ^( U( I; X' g1uM CuSO4
: X' @" \4 [* W/ w* ?8 e# j30nM H2SeO38 `" {8 Q( ?- i( m* h
1% P/S% w' Q7 A, _- S' U1 k* |

0 W. k' M1 u; H, X我自己又多添加了 20ng/ml的bFGF

咔啦

可能用得上

amosummer

回复 purehugh 的帖子4 R( A4 m  h# c: r
! u% p3 [/ A0 Y7 v
请问的EGF和bFGF配置的时候需要稀释吗？还是直接加入粉末呢？如果稀释用什么稀释呢？稀释多少倍，谢谢!

pzypig

回复 amosummer 的帖子
: Z- j% }, L* i4 q. s% C+ S) P7 Z
& L) @+ ^6 e) |& x- O- a请问您写的培养基是自己配置的还是直接购买的呢，是不是适用所有肿瘤干细胞

pzypig

回复 purehugh 的帖子% `: D5 x; x  h, m9 l
& i2 m$ S8 N% S, {6 j
请问您写的培养基是自己配制的还是直接购买的呢，哪个公司的，是不是适用所有肿瘤干细胞

purehugh

回复 pzypig 的帖子' W8 ?( c2 g9 v+ o
7 V2 v" T# s: i" I- K) Y
自己配制的。+ l; l: U2 y# b; N9 }! m5 [
DEME/F12从Invitrogen买的。
0 n8 {7 V0 Z, t) Y: BEGF，bFGF从PREPROTEHCH买的。
7 s5 i& i) f" f4 e) o( q其他都是从Sigma买的。

purehugh

回复 amosummer 的帖子! `; K1 _8 i5 l4 E8 X/ z) I

9 o8 R6 W1 H4 b6 Z* WEGF和bFGF我是从PreProTech公司买的，感觉性价比很不错，还经常送一些小礼物。
5 c; |' K! a, K7 V7 I0 k. E刚开始配制是我是按照说明说用水溶解的。
- b9 _9 p& a$ z0 W后来我改为用DMEM/F12溶解。因为我所有的培养基都是以DMEM/F12作为基础的。/ G# `- M  m2 v
我个人感觉，DMEM/F12溶解后分装效果很不错。