求助：新配置的培养液迅速变黄？？？？

SVZ

大家好，我最近在尝试做小鼠成体SVZ区的神经干细胞培养，在我配液过程中发现我的培养液在配置过程中迅速变黄，不知道这是怎么回事？
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7 t( Q9 l9 l  ^/ q" E培养液的配方如下：" T* D) ~0 @8 P' U" W. P
DMEM/F12(50ml）+bFGF(1Oul）+EGF(10ul）+B27(1ML)+N2(0.5ML)+L-Glutamin（0.5ml）9 Z% w3 {6 y) }; _1 g8 I* U# \
% Y5 _1 i6 D1 u4 H  T
除L-Glutamin外，其他都是invitrogen公司购买的。5 O1 g% G# o: j3 J  Y% W
/ ^0 e$ i( E# s
基本上是东西一加进去就黄了。但是液体放置多天还一直很清亮，所以基本排除污染的可能。* f/ T4 }; l7 h( y0 |7 ?' Z
我后来发现我分装的N2（-20度保存）冻液的颜色很不均匀，白一块黄一块的，我起初怀疑是N2变质的原因，就不加N2又重新配了一次，可还是很快就变黄了。我估计是PH值发生改变了，不知道这是否正常。各位同道是否遇到过这种情况？该如何处理？恳请高手指点，谢谢！

xiaojunhu1985

回复 1# SVZ7 p' g4 O8 b7 r+ M
在配置过程中，应该要避光。有没有避光啊？

zsc78

不知道你说的发黄到什么程度，因为像DMEM/F12本身的颜色就不是很红，有点儿棕色或棕红色（也不知道怎么形容），没有DMEM那么红，如果是这种就没有问题。如果是特别黄，就请检查你的添加物。因为细胞因子有些说明书是说用一定浓度的乙酸溶解，如果是这样就肯定发黄。

SVZ

谢谢楼上朋友的指点！6 O6 f3 C  E$ r  j3 A& ]
6 x" s  F; g, Z; `, O* M
我在配制的过程中没有避光，因为几乎所有的试剂除DMEM/F12外，都没有专门要求避光，DMEM/F12有要求说避光，但是大家经常放到玻璃门的药品储藏柜经常见光，但还是很好用。
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至于发黄的程度，黄得有点像很稀且清亮的蜂蜜，稍微透一点点红。我添加的细胞因子的稀释都是按照说明书来的，说明书中没有用乙酸溶解的特殊要求。

hualin840518

这基本上是正常的4 n' b5 ?4 `: F) U  T
培养效果没有什么变化吧
: l  V. x( U1 ?2 H. `) g" r“黄得有点像很稀且清亮的蜂蜜，稍微透一点点红”' I7 W, o  F( ?
可能是在培养液里面添加其它成分后
+ t0 L8 y( r2 \6 _7 A6 ?PH值发生了改变所致
8 {  F2 R5 r, j$ n0 `8 ^照你的描述，应该没有沉淀生成！

cortex

这可是正常的，当你加了L-glutamin和B27及N2后，变化一点颜色（不应该说是黄色吧，不过和蜂蜜有点像）是正常的。你是否发现用着用着，他又会变红。

SVZ

非常感谢，这下我心里就有谱了。4 |5 m4 i8 M; D" u: I3 D7 @
确实没有沉淀产生，也确实加在细胞培养皿中放到培养箱培养后会变红一些。但是4度保存的培养液一直是发黄的。, V6 {+ e5 a' F; V+ F8 X5 a
因为是新手，不知道是否必须调PH值才可以用。现在我决定再培养一批细胞，看一下情况吧。
2 k3 X# ]' j( O* b& l' Z再次感谢！

SVZ

给大家汇报一下吧，培养液变黄，但是对我的后期细胞培养没有产生什么影响，多谢大家指点。

jennyshy

正常的颜色，我以前用pH计测过，pH7.2-7.4，用着用着就变红了。

huangfei2010

回复 6# cortex " s6 ]1 z3 \* @+ u) X
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1 W& g) G* ?, }! m6 \+ d3 x8 S& V
    这位师兄，我就遇到和你说的情况一样，刚配好的培养基颜色有点淡黄透亮，加到细胞培养瓶中一夜就变成粉红色的了，感觉细胞在这个粉红的培养液中张的不好啊，请问师兄你有遇到这种情况吗