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s* z, X6 a7 C* n/ E2 H2 q w我最近还做了一批胎鼠的脑神经干细胞培养,培养的效果很好,消化:0.25%trypsin,15min,离心1000rpm,3min.现已出现了大量神经球,状态很好,基本没有碎片。这应该可以排除我试剂的问题。应该还是组织特异性的原因. 申明一下,我做的是10周小鼠的SVZ干细胞培养。1 A( ^: T4 B4 g$ p7 V$ a$ @: @
$ g, H7 j" W0 ~/ p5 W' ]/ ~从理论上讲,10周的小鼠比胎鼠的组织更难消化,所以胰酶的消化时间应该长一些。而且,我也尝试了缩短胰酶消化时间,减少吹打次数,但是还是以失败而告终。而且我查了很多文献,发现各个文献的差异都比较大,这让我很费解。我的感触是,细胞培养没有金标准。1 \" J' N9 Z: C: t6 a( b+ Z
8 v4 Z$ |1 L% d现在,我准备换用TrypLE消化液(invitrogen的一种trypsin替代液)试用一下。我会向大家汇报结果的。 |
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