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本人做的D3的MTT试验,包含了四种药物:青霉素、5-FU、苯妥英和尼美舒利。前两者是水溶性药物,后两者是水不溶性药物,因此,后两者用DMSO先溶解,之后取含相同DMSO量的母液分别补足培养基使之成为各相应浓度梯度的受试药液,保证每个浓度梯度之后所含有的DMSO的量都一样,且DMSO的量很少(一般是取200微升用DMSO溶解的母药液加入到9.8毫升的培养基中,之后加样时每孔200微升含药培养基中的DMSO浓度几乎微乎其微,所以DMSO对D3细胞的损伤应该极小,且就算有损伤也保证了每孔的损伤完全相同)。我前三次试验没问题,虽然数据不理想,但都能做到显示颜色梯度。从第四次试验开始发现,除了零孔之外(零孔的OD值也比以前三次的值至少减低一半),其余给药孔几乎全无颜色梯度显示,几乎白板。后来重做一次发现连零孔的的值都是白板了。之后,就找不同的原因,也降低了药物的受试浓度很多倍了,还是没有颜色梯度。但是水溶性的那两种药都没问题,而且线性良好。而同时还做了3T3细胞的MTT也是同样的四种药,3T3细胞也没有问题,四种药都能出来颜色梯度。
% L$ s7 n3 ]! o6 }3 ^, Z0 V* i( M这个问题一直困扰我到现在,还是没有解决,不知道什么原因,有乃位高手不吝赐教,小M不胜感激啊! |
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