干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
朗日生物

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 34124|回复: 16
go

骨髓间充质干细胞的培养     [复制链接]

Rank: 2

积分
82 
威望
82  
包包
889  
楼主
发表于 2010-7-20 12:11 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
请教一下,我最近两次养的骨髓间充质干细胞总是不贴壁,贴壁的非常少,这可能是什么原因呢?谢谢!
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 2 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1  包包 + 2   查看全部评分

Rank: 8Rank: 8

积分
306 
威望
306  
包包
3648  

小小研究员

沙发
发表于 2010-7-20 13:28 |只看该作者
上传图片 最好有方法步骤 大家才能帮助你找问题原因

Rank: 2

积分
111 
威望
111  
包包
1121  
藤椅
发表于 2010-7-20 14:45 |只看该作者
就是了,这样子让人怎么解答

Rank: 1

积分
14 
威望
14  
包包
97  
板凳
发表于 2010-8-5 21:16 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
检查一下操作程序

Rank: 2

积分
82 
威望
82  
包包
889  
报纸
发表于 2010-8-5 22:19 |只看该作者
4 l* f! ~. S. H8 ?# V0 l2 O! X
这是照片,请大家帮忙看一看,这是什么问题呀?
6 g2 t+ r0 h5 a1 }$ ~. M谢谢!
附件: 你需要登录才可以下载或查看附件。没有帐号?注册
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 2

积分
71 
威望
71  
包包
198  
地板
发表于 2010-8-5 23:02 |只看该作者
不是不贴壁,上面的亮圆点有可能是造血干细胞,骨髓间充质干细胞不纯,建议采用贴壁时间差法换液洗去杂细胞。
1 A, j9 Y& z. W' a0 C看照片上贴壁的细胞状态也不是很好,建议原代接种的细胞密度高一些,因为你种的细胞中还含有大量的杂细胞
: r1 H0 j! p  {( Z! j还有你试验的步骤、试剂都没有,不好从这些方面分析,总之,细胞状态是由综合的因素决定的
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 2

积分
124 
威望
124  
包包
899  

热心会员

7
发表于 2010-8-5 23:59 |只看该作者
有些因素会影响贴壁的 比如你用肝素抗凝 如果肝素浓度太高 就会影响贴壁 一般24小时后就可以首次换液了 换液除去不贴壁的血细胞 也有3-5天首次换液的 看自己的情况决定首次换液的时间 看你的细胞如果是首次换液后的情况 应该贴壁的细胞挺多的 因为细胞增殖很快 一两天就要传代一次
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 2

积分
82 
威望
82  
包包
889  
8
发表于 2010-8-6 00:01 |只看该作者
实验步骤:2只2周SD鼠,脱颈处死,酒精中浸泡5分钟,PBS冲洗,分离股骨、胫骨,5ml注射器吸取DMEM培养液冲出骨髓,800转离心5分钟,接种到两瓶75mm培养瓶中,48小时首次换液。  换液后,观察贴壁的细胞很少,而且,之后的数天内,细胞状态越来越差,且生长很慢,这可能是什么原因呢?
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 2

积分
82 
威望
82  
包包
889  
9
发表于 2010-8-6 00:03 |只看该作者
上述图片是原代3天的照片

Rank: 2

积分
124 
威望
124  
包包
899  

热心会员

10
发表于 2010-8-6 16:54 |只看该作者
如果是原代第三天的照片 那么细胞说明贴壁的还不少 如果正常情况下 再换一次液 除去不贴壁的细胞 再过一两天就会长满 就可以传代了 而且你用的培养基血清的浓度 及血清的质量都会影响你的细胞的生长的 一般来说 含10%-15%血清的培养基就可以 如果血清浓度再高 会引起细胞分化的
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

‹ 上一主题|下一主题
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2025-5-28 17:20

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.