
- 积分
- 8
- 威望
- 8
- 包包
- 117
|
本帖最后由 细胞海洋 于 2010-7-29 09:58 编辑 1 }* J4 U+ _! a: ]$ _* i
7 a1 B& G4 D* T/ {) f" H# b1 \
刚刚接触神经干细胞培养,遇到了不少问题,希望大家能多照顾照顾,集思广益.感激不尽。
2 S' a. T+ B# {, G, u$ S: i p 1、 出生24h内的SD大鼠,取海马,肉眼下除脑膜及血管,可参考多数文献,都说是在显微镜下除脑膜及血管的,这影响大不大呢?
$ L6 ], I* n" I: E2 P- x! x9 g 2、0.125%胰酶/EDTA,37℃消化10min,10%血清终止消化,1000r/min离心10min,DMEM/F12洗涤一次,200目筛网过滤。接种后镜下观察可看到条索状的物质,是不是消化过头了?而且接种数小时后镜下观察发现,细胞聚集成团了,是不是消化没充分啊?矛盾中。. X6 ?6 t/ l/ A/ ^) S
3、我采用的是不含血清的完全培养基(DMEM/F12 1:1+2%B27+FGF 20ng/ml+EGF 20ng/ml+2% L-Glu),可一般在培养2~3天后,发现细胞营养不够,很少出现神经细胞球。是不是我的培养基成分有问题呢? |
-
总评分: 威望 + 5
包包 + 10
查看全部评分
|