[求助]小鼠胚胎干细胞核型图，大家帮我看看！

iseeyou1210

一般看es细胞的karyotype就是数数染色体的数目，小鼠是40条，大鼠是42条。* D- l) D6 V/ T6 t! [! e9 k1 R
最好能多计数一些完整的分裂相。

iseeyou1210

我觉还有一个问题是trypsin的处理时间，es细胞是成团生长，dissociate的不充分也不好，我一般是用0.25%的trypsin处理10分钟，充分dissociate ES细胞后，然后低渗20分钟 at RT.' n9 V& I' I* G! s- b
细胞的浓度也不要太大。
; P' B) W; q7 v我觉得1米 drop和0.5cm drop结果都一样。. W' e- c; u! m) i4 N& ~
我都是用叫10ul直接到slide上，也不错。& U( _4 m. A6 ~0 k" h& ^+ o
还有，我从来都没有看到过publication说低渗1小时，我觉得太多了。

iseeyou1210

回复 11# liulilin
- I: e; Z, u; f  R/ f1 }
1 F3 _# n: a; ?6 R* \lz，这个是一个G带的结果。9 p* z9 i  f+ c- i
对于一般的ES细胞的检测，只要看看是不是ES细胞维持着2n=40的核型就可以了。

iseeyou1210

回复 12# hcluo , V! N( Z- x) Q) B; r
6 s1 g4 z. Y2 C5 l% r0 D% N$ }

+ `: y- P. t+ I7 x4 w  看起来很像是一个雄性的。
1 ]& b3 I+ X9 Q+ h. f5 i: P  }好像有一个Y。