[求助]小鼠胚胎干细胞核型图，大家帮我看看！

iseeyou1210

一般看es细胞的karyotype就是数数染色体的数目，小鼠是40条，大鼠是42条。
1 x  Y" ]( \) Z* b2 _; a最好能多计数一些完整的分裂相。

iseeyou1210

我觉还有一个问题是trypsin的处理时间，es细胞是成团生长，dissociate的不充分也不好，我一般是用0.25%的trypsin处理10分钟，充分dissociate ES细胞后，然后低渗20分钟 at RT.1 r, z; I$ |5 j$ g2 e$ ^
细胞的浓度也不要太大。/ |: z, S4 F2 o6 O8 s6 _
我觉得1米 drop和0.5cm drop结果都一样。
) {: }( i& [3 d我都是用叫10ul直接到slide上，也不错。- I+ ?$ {5 }9 D4 H% g
还有，我从来都没有看到过publication说低渗1小时，我觉得太多了。

iseeyou1210

回复 11# liulilin 9 l1 [$ m( g* i7 }4 D: J

$ Q2 t1 K/ ~8 C* d( K  G# H3 w1 `2 klz，这个是一个G带的结果。9 S# ^; k; L- P5 C. I
对于一般的ES细胞的检测，只要看看是不是ES细胞维持着2n=40的核型就可以了。

iseeyou1210

回复 12# hcluo
1 J, j2 N, L) o( m8 P) p" h  f* {2 x4 z/ L  z. H7 H6 j' G

: q8 p3 s$ A; y0 C# D  看起来很像是一个雄性的。
, V) ?: O9 h* {$ b! n4 e. e0 }$ ~好像有一个Y。