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[求助]小鼠胚胎干细胞核型图,大家帮我看看!   [复制链接]

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楼主
发表于 2010-8-10 02:16 |显示全部帖子
一般看es细胞的karyotype就是数数染色体的数目,小鼠是40条,大鼠是42条。7 S! J6 v7 g$ K5 M7 _9 L/ ]
最好能多计数一些完整的分裂相。
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沙发
发表于 2010-8-10 02:19 |显示全部帖子
我觉还有一个问题是trypsin的处理时间,es细胞是成团生长,dissociate的不充分也不好,我一般是用0.25%的trypsin处理10分钟,充分dissociate ES细胞后,然后低渗20分钟 at RT.
0 _8 t1 ]$ @+ x# F细胞的浓度也不要太大。
) a6 {  g' C- R) {2 O我觉得1米 drop和0.5cm drop结果都一样。
9 G5 c+ O) u8 b+ Z我都是用叫10ul直接到slide上,也不错。. ^* D3 \% L5 q8 d& E
还有,我从来都没有看到过publication说低渗1小时,我觉得太多了。
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藤椅
发表于 2010-8-14 22:48 |显示全部帖子
回复 11# liulilin
1 h" Z- ?+ ~2 ^/ H7 B6 v
: d' _1 ~* r0 R0 q& Hlz,这个是一个G带的结果。
8 b% w; F* i! [; P. Q对于一般的ES细胞的检测,只要看看是不是ES细胞维持着2n=40的核型就可以了。
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板凳
发表于 2010-8-14 22:49 |显示全部帖子
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回复 12# hcluo / B/ v& N3 s! t6 Z% ~$ s3 `) J! H

( }! W5 \8 R7 ^
3 Z9 ~: X' n. R" O7 y  看起来很像是一个雄性的。
$ M# A  D" s+ `2 o  b4 I好像有一个Y。
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