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[求助]小鼠胚胎干细胞核型图,大家帮我看看!   [复制链接]

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楼主
发表于 2010-8-10 02:16 |显示全部帖子
一般看es细胞的karyotype就是数数染色体的数目,小鼠是40条,大鼠是42条。
1 x  Y" ]( \) Z* b2 _; a最好能多计数一些完整的分裂相。
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沙发
发表于 2010-8-10 02:19 |显示全部帖子
我觉还有一个问题是trypsin的处理时间,es细胞是成团生长,dissociate的不充分也不好,我一般是用0.25%的trypsin处理10分钟,充分dissociate ES细胞后,然后低渗20分钟 at RT.1 r, z; I$ |5 j$ g2 e$ ^
细胞的浓度也不要太大。/ |: z, S4 F2 o6 O8 s6 _
我觉得1米 drop和0.5cm drop结果都一样。
) {: }( i& [3 d我都是用叫10ul直接到slide上,也不错。- I+ ?$ {5 }9 D4 H% g
还有,我从来都没有看到过publication说低渗1小时,我觉得太多了。
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藤椅
发表于 2010-8-14 22:48 |显示全部帖子
回复 11# liulilin 9 l1 [$ m( g* i7 }4 D: J

$ Q2 t1 K/ ~8 C* d( K  G# H3 w1 `2 klz,这个是一个G带的结果。9 S# ^; k; L- P5 C. I
对于一般的ES细胞的检测,只要看看是不是ES细胞维持着2n=40的核型就可以了。
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板凳
发表于 2010-8-14 22:49 |显示全部帖子
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回复 12# hcluo
1 J, j2 N, L) o( m8 P) p" h  f* {2 x4 z/ L  z. H7 H6 j' G

: q8 p3 s$ A; y0 C# D  看起来很像是一个雄性的。
, V) ?: O9 h* {$ b! n4 e. e0 }$ ~好像有一个Y。
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