[求助]小鼠胚胎干细胞核型图，大家帮我看看！

iseeyou1210

一般看es细胞的karyotype就是数数染色体的数目，小鼠是40条，大鼠是42条。8 y8 R& Y# K( _/ e
最好能多计数一些完整的分裂相。

iseeyou1210

我觉还有一个问题是trypsin的处理时间，es细胞是成团生长，dissociate的不充分也不好，我一般是用0.25%的trypsin处理10分钟，充分dissociate ES细胞后，然后低渗20分钟 at RT.
9 L9 ^) x- V( N0 b$ U4 u7 i" O细胞的浓度也不要太大。
( E' [" x2 L& J, D7 n/ s我觉得1米 drop和0.5cm drop结果都一样。+ Z8 W# t% a( \
我都是用叫10ul直接到slide上，也不错。
( y" Q& I4 Z* e8 Q; n# X9 h还有，我从来都没有看到过publication说低渗1小时，我觉得太多了。

iseeyou1210

回复 11# liulilin
, q' }% t! y, o! c! h* f$ ^1 {  R1 d0 b( j
lz，这个是一个G带的结果。
- r5 J7 M. l4 s% K  d. a8 @+ h对于一般的ES细胞的检测，只要看看是不是ES细胞维持着2n=40的核型就可以了。

iseeyou1210

回复 12# hcluo & G5 A  f& M' y. ?
7 M1 u9 k  j0 M! A6 x; b. @
# H( {4 [+ L7 E6 c$ t) F
  看起来很像是一个雄性的。" r0 _% r% F7 C6 D; A" r
好像有一个Y。