[求助]小鼠胚胎干细胞核型图，大家帮我看看！

iseeyou1210

一般看es细胞的karyotype就是数数染色体的数目，小鼠是40条，大鼠是42条。7 S! J6 v7 g$ K5 M7 _9 L/ ]
最好能多计数一些完整的分裂相。

iseeyou1210

我觉还有一个问题是trypsin的处理时间，es细胞是成团生长，dissociate的不充分也不好，我一般是用0.25%的trypsin处理10分钟，充分dissociate ES细胞后，然后低渗20分钟 at RT.
0 _8 t1 ]$ @+ x# F细胞的浓度也不要太大。
) a6 {  g' C- R) {2 O我觉得1米 drop和0.5cm drop结果都一样。
9 G5 c+ O) u8 b+ Z我都是用叫10ul直接到slide上，也不错。. ^* D3 \% L5 q8 d& E
还有，我从来都没有看到过publication说低渗1小时，我觉得太多了。

iseeyou1210

回复 11# liulilin
1 h" Z- ?+ ~2 ^/ H7 B6 v
: d' _1 ~* r0 R0 q& Hlz，这个是一个G带的结果。
8 b% w; F* i! [; P. Q对于一般的ES细胞的检测，只要看看是不是ES细胞维持着2n=40的核型就可以了。

iseeyou1210

回复 12# hcluo / B/ v& N3 s! t6 Z% ~$ s3 `) J! H

( }! W5 \8 R7 ^
3 Z9 ~: X' n. R" O7 y  看起来很像是一个雄性的。
$ M# A  D" s+ `2 o  b4 I好像有一个Y。