[求助]小鼠胚胎干细胞核型图，大家帮我看看！

iseeyou1210

一般看es细胞的karyotype就是数数染色体的数目，小鼠是40条，大鼠是42条。
2 o7 M/ V% Z2 T+ s最好能多计数一些完整的分裂相。

iseeyou1210

我觉还有一个问题是trypsin的处理时间，es细胞是成团生长，dissociate的不充分也不好，我一般是用0.25%的trypsin处理10分钟，充分dissociate ES细胞后，然后低渗20分钟 at RT.
0 G  ], ^7 Z' L' |) i* l细胞的浓度也不要太大。$ g- {% l" p# b0 K) a
我觉得1米 drop和0.5cm drop结果都一样。
- C+ c+ K! @, _我都是用叫10ul直接到slide上，也不错。
) q0 e' c, d, C# b! u. ?6 B" I还有，我从来都没有看到过publication说低渗1小时，我觉得太多了。

iseeyou1210

回复 11# liulilin " w; j3 b0 {% e& h( b
1 g+ U+ z* V: A+ `* `* E* ^% {
lz，这个是一个G带的结果。
8 F. i; W2 X, E, E$ o对于一般的ES细胞的检测，只要看看是不是ES细胞维持着2n=40的核型就可以了。

iseeyou1210

回复 12# hcluo
" I; B0 G, J  ^+ D! l: a6 B- q
8 |3 P( m, X+ p. g( L8 \; o6 D9 A6 D4 z8 K+ l; ?$ t* h! x
  看起来很像是一个雄性的。* J/ H& y2 f; z
好像有一个Y。