[求助]小鼠胚胎干细胞核型图，大家帮我看看！

iseeyou1210

一般看es细胞的karyotype就是数数染色体的数目，小鼠是40条，大鼠是42条。& \9 B% o0 Q4 L4 a/ a
最好能多计数一些完整的分裂相。

iseeyou1210

我觉还有一个问题是trypsin的处理时间，es细胞是成团生长，dissociate的不充分也不好，我一般是用0.25%的trypsin处理10分钟，充分dissociate ES细胞后，然后低渗20分钟 at RT.9 ?& q# |$ B8 n# l+ ?
细胞的浓度也不要太大。
! N( `% ?, @1 O2 m8 k/ g- z我觉得1米 drop和0.5cm drop结果都一样。
) i# B+ Y( i+ i; i我都是用叫10ul直接到slide上，也不错。
; S! M" n! O+ V& @1 w还有，我从来都没有看到过publication说低渗1小时，我觉得太多了。

iseeyou1210

回复 11# liulilin - v5 Z3 Y. T! P. ?1 ?

) c% h) V2 b; Z+ `$ t! b/ R* V- Alz，这个是一个G带的结果。
9 J. Z0 o7 x5 a+ I$ U% C9 U2 [2 m+ M对于一般的ES细胞的检测，只要看看是不是ES细胞维持着2n=40的核型就可以了。

iseeyou1210

回复 12# hcluo
% u4 M( F2 k- Z" Y7 u# W) l, G
8 c. E, u( o6 \
! e6 k* G3 ^/ J2 g6 R  看起来很像是一个雄性的。2 g0 O' C  m9 F! R6 l
好像有一个Y。