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本帖最后由 细胞海洋 于 2010-8-12 22:30 编辑
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昨天给原代的神经干细胞传代(是第十天的原代细胞),传代前干细胞球还是挺好的。但是我用0.25%的胰酶消化成单细胞再过两天就什么细胞都没了,不知什么原因?请各位帮帮忙看看。我的胰酶是配好2月在-20℃冰箱里存放的。传代方法是:1。将培养瓶中的悬浮细胞及培养液吸入离心管1000转每分中离心5分钟。2。经上清液的一半加入新的培养瓶中(半量换液),其余的上清液吸掉,在沉淀中加入胰酶混匀,边用吸管吹打,约十分钟。3。再离心1000转每分 5分钟。4。吸掉上清液,加入新鲜培养基混匀后转入培养瓶中。因为怕用血清终止消化的话已引起神经干细胞分化,所以没用血清终止消化。不知道为什么到第二天一看,什么细胞都没有了,只有些细胞碎片。
: {4 o7 K, b; e( ^# _这是传代前的神经干细胞球,大家看看应该没什么问题吧? |
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