核型分析G显带技术(附图）

liulilin

9 `0 b+ Q4 C: {3 S1 J7 ?) a8 R' x

! t, `" V3 K/ S  G本人最近作染色体核型分析G显带，在G显带这一个总是得不到理想的G显带图片。我所用的方法是，（1）滴完片子之后75°烘烤3-4小时，室温放置过夜老化。（2）在消化前放在37°烘箱烘烤30分钟，（3）采用PBS配制胰酶 配成浓度为0.025％，（4）将配制好的胰酶放在37°水浴锅里保持恒温，（5）消化2分钟左右。（6）立即取出在蒸馏水中涮洗两次。（7）染色 ，（8）显微镜下观察结果。$ y$ S: A! F% y# O$ y" L8 l
     如下是我制作的结果图。     请各路高手指点指点 多多指点！

2010-9-1 16:54 上传

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zpzp0312

这是什么细胞的染色体啊？. L, M8 h3 E0 B5 ?: q
另外，是什么动物的？2 {4 p5 u5 S# h0 ?: |8 o
有多少条？6 ]  ^0 E, F# L& l
怎么感觉数不清楚？

liulilin

回复 2# zpzp0312 ! Z" T8 h3 V* z; ?, P  F! T
# n+ [% x1 C( u0 q2 t
9 ~: n& L0 c$ Q' c# \
    您好 这是人淋巴细胞的的，是的 条数是不够，但是我想探讨的是如何得到清晰的“深浅”显带效果图，请指教！

zoutaoyuan

胰酶的消化时间要根据环境温湿度和玻片上的细胞密度决定/ ?$ p8 L' F% x, U; Q% f
第二张图2点钟方向那条稍长的建议在镜下多看一下

hawkyiger

最近也在做间充质干细胞的G带显色，结果总是很不好，你能把详细点的步骤给我看看么，借鉴一下

panyanfei

这跟胰酶的浓度也有关吧

lifescience1

- b' p. m8 J- l4 n7 A8 d& [( B9 u0 J( B! k5 r" `, d' U$ N
应该是用吉姆萨液染色液染色的吧  有可能是苏木精染液染色的哈 他们的染色有点相似

liulilin

回复 5# hawkyiger . l3 R4 m. H. X- H) I8 f; h: i
. l7 h) s8 o3 d) c

$ v1 ~; Y4 G4 G5 U  T2 R    滴完片子之后75°烘烤4小时，室温放置过夜（因为烘烤完一般都是晚上了），第二天做前37°烘烤30分钟，  然后就是用PBS将胰酶配成百分之0.025的浓度， 并且将消化缸放置于30°水浴中 保持胰酶消化液的温度恒定，然后就是消化2分钟左右（具体时间具体定），快速在蒸馏水中涮洗两次。百分之十吉姆萨染色3分钟。

zpzp0312

我怎么记得胰酶浓度是0.25％
: Z  _1 q+ d7 v7 S是不是楼主消化程度有些低啊？

hawkyiger

回复 8# liulilin
5 ^( p! q4 ~% Z6 E8 O$ _: P胰酶看到一般介绍是0.25%，0.025%会不会太低