核型分析G显带技术(附图）

liulilin

7 E4 G. G9 _# v* |
0 p9 E; o+ ?; A# k本人最近作染色体核型分析G显带，在G显带这一个总是得不到理想的G显带图片。我所用的方法是，（1）滴完片子之后75°烘烤3-4小时，室温放置过夜老化。（2）在消化前放在37°烘箱烘烤30分钟，（3）采用PBS配制胰酶 配成浓度为0.025％，（4）将配制好的胰酶放在37°水浴锅里保持恒温，（5）消化2分钟左右。（6）立即取出在蒸馏水中涮洗两次。（7）染色 ，（8）显微镜下观察结果。
5 e. X9 Y5 z' Y3 T! b$ y  H$ p9 O) @/ j     如下是我制作的结果图。     请各路高手指点指点 多多指点！

2010-9-1 16:54 上传

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zpzp0312

这是什么细胞的染色体啊？
, o4 R# ~7 ~' I! z另外，是什么动物的？3 t. N6 A* ?/ J' b9 N+ r. c. l) w
有多少条？, ?1 k& u) k6 ]% \" n. o
怎么感觉数不清楚？

liulilin

回复 2# zpzp0312
3 ^8 `4 d- ], I/ Q- V$ F/ e' ?4 ~: {; P( Y" _" h9 q9 U" Q/ B
# q) S7 A: I/ F3 x4 ~
    您好 这是人淋巴细胞的的，是的 条数是不够，但是我想探讨的是如何得到清晰的“深浅”显带效果图，请指教！

zoutaoyuan

胰酶的消化时间要根据环境温湿度和玻片上的细胞密度决定
' K( q7 Z/ y9 z$ n9 [第二张图2点钟方向那条稍长的建议在镜下多看一下

hawkyiger

最近也在做间充质干细胞的G带显色，结果总是很不好，你能把详细点的步骤给我看看么，借鉴一下

panyanfei

这跟胰酶的浓度也有关吧

lifescience1

4 P, I! M8 }9 f' a3 g2 U$ P: v9 e# G* Y: I# A* D( x
应该是用吉姆萨液染色液染色的吧  有可能是苏木精染液染色的哈 他们的染色有点相似

liulilin

回复 5# hawkyiger : v" ]0 F: r9 ]$ J1 k4 |

# f" t: {( t) }5 [: f) N/ e* H3 p
- t% r- W9 f# o. _* f" u& G    滴完片子之后75°烘烤4小时，室温放置过夜（因为烘烤完一般都是晚上了），第二天做前37°烘烤30分钟，  然后就是用PBS将胰酶配成百分之0.025的浓度， 并且将消化缸放置于30°水浴中 保持胰酶消化液的温度恒定，然后就是消化2分钟左右（具体时间具体定），快速在蒸馏水中涮洗两次。百分之十吉姆萨染色3分钟。

zpzp0312

我怎么记得胰酶浓度是0.25％
/ e3 v3 [* [, i4 t( p, }是不是楼主消化程度有些低啊？

hawkyiger

回复 8# liulilin , }  M( ]% p1 D0 h$ Y
胰酶看到一般介绍是0.25%，0.025%会不会太低