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本帖最后由 feifei105 于 2010-9-3 20:46 编辑 4 e! N. O. l6 O. i. j' _
) ?5 S7 q1 ]3 ]4 n9 ~最近阅读几篇文献,发现几个问题,不知如何解决,希望与大家讨论一下。& b5 W. M$ x! j- N4 H
/ m! _& k. a& T& [! k1.有人通过脂肪组织的免疫组化发现脂肪间充质干细胞定位于毛细血管外围,紧贴着血管外壁,还有人认为ADSC是血管外壁的组成细胞,诱导可分化为血管平滑肌细胞和内皮细胞,在血管发生,修复等过程中起着重要作用,所以也可以称之为血管干细胞。大家怎么看待ADSC也可叫做血管干细胞的问题?% y4 N$ m' T4 _, a
参考文献见附件1:这篇综述影响因子不高,但实验室还可以,而且对于刚接触不久ADSC的我来说,觉得写得还好,大家可以参考下。& g, L) @2 T! ~: B/ W/ o2 T- u7 ~
3 p' ?4 [/ Z9 b R" T. d2.如何证实一个蛋白在ADSC上的表达?其关键就是ADSC目前无特异的标记Marker。附件文献2是个典型的代表:首先它没采用流式方法检测一系列抗原CD44 CD90 CD105等等阳性,CD31阴性来证实其细胞是ADSC,而是采用诱导其成脂肪,成骨并染色的方法,发文章时这样做是否可行?是否被认可?其次,证明目的蛋白在ADSC上表达时,用的是F-actin和目的蛋白的抗体双染,这样做是否有说服力?这个问题怎么解决,困扰我很久,难道要用CD90(+) 目的蛋白(+);CD105(+) 目的蛋白(+);CD31(-)目的蛋白(-),进行多组双染吗?
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# n9 o6 o# j! x9 A1 n6 _0 M, V3.问几个基础的问题:⑴ 我看有些文献在消化脂肪组织时用胶原酶和0.1%BSA,请问BSA 在其中起什么作用呢?必须要加吗?
) {" [% d& b2 [1 T7 K⑵ 如果分离人的脂肪干,组织来源最好是皮下脂肪,还是肠系膜处脂肪,还是其他?我担心肠系膜处的细胞种类比较复杂。4 M6 E2 t& {8 z: y3 T
⑶ 看到有人说分离人的脂肪干时,有性别之说,就是男的好分好养,女的相对难些?如果有,有这方面的文献吗?- V8 @+ A- C, n: w" P3 i/ M3 X
* s+ i( s! J. |# H( W/ Q希望大家多多讨论.
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