MSCV-IRES-GFP的详细图谱

彩虹

请问有使用MSCV-IRES-GFP这个逆转录病毒载体的吗？我想知道这个载体的详细图谱，有的可以分享一下吗？谢谢

wnavy200299

回复 runsong 的帖子% L6 I9 t+ c/ d4 g" u6 z' B

1 g! A6 w& G  j) Q7 S8 s% Q感谢你能分享你的感受！谢谢！让后来的人少走很多弯路！

ruyudeshui

回复 runsong 的帖子9 r: Y$ }) k. u% d
' F3 z4 i( w: P# b* S$ C3 T
您好，您有MSCV-IRES-GFP的图谱和序列吗？能不能分享？谢谢！

jamesshea

真是纠结啊

ada800515

另外MSCV-IRES-GFP是不是就是pMIG这个载体啊

ada800515

请教一下runsong ，是不是所有的逆转录病毒载体都转染效率低啊？我用pMX-IRES-GFP转染时效率也特别低，不知道你是否用过这个质粒啊？

runsong

看看我“不再自残”的签名，那是我那个时候的伤疤

runsong

嘿嘿，我宝贵的一年时间全浪费在这里面了。
, r% S1 X& x, d, n5 K, C4 e6 o我建议你顺应潮流，做慢病毒吧，资料相对要多得多，效果相对要好很多。. J0 ]. P0 }3 P4 d" }* B9 t( o% m& d
如果不要求稳转，只是想提高转染效率的话可以用腺病毒。操作更简单，转染效果更好。
+ N2 W5 O& _( @" F" ^; d8 f8 v
, {  A. J5 v4 ]5 r0 A当时我老板得到这个载体像得到宝贝似的，然我做这个。是啊，别人给的东西不花钱，总想低投入高产出。哪里有那么好的事。

runsong

我奉劝你千万别用这个载体，以及所有PMSCV系列载体。7 D* @; D" {& i+ j7 R
这些都是逆转录病毒载体，包装效率、感染率都很低，面临被淘汰的命运。可以注意一下应用逆转录病毒载体的文章现在已经很少了，慢病毒载体已经更新3代了，逆转录病毒载体几乎无人问津、没有发展。
1 @3 f; a9 t1 v  j! ]! A5 L4 Q. |我曾经用过这个系列的载体，MSCV-IRES-GFP的表达效率低得可怜，60皿中转完后就1、2个细胞是亮的，更别提攻毒了。用PMSCV做的载体我他妈的反反复复折腾了一年，连病毒颗粒都没得到。期间我还构建了PMSCV-GFP载体，转PT67后就5%能亮，攻毒四次后目的细胞完全没有GFP的表达。真他妈不知道用这套系统的文章是咋发的。7 Q, b1 V0 a: m1 |0 o6 M. E
我们实验室有个博士，和我一起做这个，他比我强，但折腾了两年也没得到稳定的结果。诚实的他在他的博士论文里只字未提他这方面的工作。

Jing937

请问您有这个质粒或者知道国内哪有卖的吗？谢谢！