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楼主: deron
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[讨论] 都说无菌操作要这严格那规范——大家不妨晒晒自己的豪放操作吧!也给新手们打打气   [复制链接]

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楼主
发表于 2010-9-6 21:38 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
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本帖最后由 deron 于 2010-9-6 22:01 编辑
* v1 V) E7 ]( T/ Z
" d# f7 \4 t6 ~* S& ]* q2 l6 c/ v. c半年多细胞养下来,我们一致认为养女人比养细胞简单多了,起码她们不会动不动就死给你看。。。
6 I( T; W! E" n! `+ ~开个玩笑,都说万事开头难,不过跟细胞混熟彼此了解以后,就可以很随意了。* j! z/ S; }0 R0 U+ m
1.进出实验室一套白大褂不带换的,经常出去买个饭,回来接着进无菌室。
. Y1 ^$ L' D% }6 g2 x4 y2.不戴手套,喷点75%的酒精就上台了。# H: x; E4 y& M1 M
3.师妹一次换液烧瓶口的时候突然酒精灯蹿火了,她下意识往瓶口那儿一吹,火焰立下就灭了……不过后来细胞也没事儿(特技效果慎勿模仿)
- R! V$ i& {- n$ }- ^1 I4.冻存细胞不经程控降温直接从4度扔进-80冰箱
8 i, |% A- ^( t- I5.帽子口罩爱戴不戴
/ Q. e. J" H& j* L) v8 {) z6.兴起时穿着休闲的衣服,进无菌室往手上喷点酒精,打开培养箱,捏着瓶口就上显微镜观察
2 s( x4 Q) K* g3 I7.胰酶血清直接扔进40度水浴化着,有时候化开好一会儿了才记起来。9 c( p3 D& U2 A8 v( d" p9 ]8 H
8.培养基和缓冲盐溶液直接扔到台子上照紫外。
9 Z$ I: y) W+ E5 c9.急用器械又来不及灭菌的时候,拿个小铁碗倒点酒精进去,扔进器械点上火烧一小会儿就行。) b8 D8 m8 \( u* B2 m+ |. c
10.组织块“吧唧”掉台子上了,夹起来用缓冲液冲冲接着用。3 A0 Z! @# r, }0 }
11.有一阵子酒精灯坏了,就只开着风机“裸”操作,居然没有问题。
0 ^3 n- o8 R& W9 ~+ }得到的几个结论——帽子口罩手套白大褂不是保护细胞是保护自己用的;无菌室无菌台本身的洁净远比几个酒精灯火焰来得实在;很多东西你晓得成分原理之后自然能够游刃有余天不怕地不怕了。
0 [. D4 T5 ^: V也惨过,右手有三四个月一直处于无毛的荒芜状态,细胞有两个月就是不给你好形态看,有一次给所有细胞换液时搞错了培养基结果差点一个月心血全流掉~~~
. k3 u4 ^( A$ n& G4 w3 R话说实验室一大姐大级别的人物第一次给96孔板换液的时候把板子从超净台里拿出来,华丽丽的往垃圾桶里一甩,接着又一甩……结果染菌了3 v. c/ q; i1 O; N0 Q% J

* U' c( S# y4 D; ~1 b也不能毫无章法,个人以为三个必须的原则:) x1 O8 C/ K* E0 [9 d6 ~5 U2 D8 ~( z6 v
1.操作必须保证在超净台深处,移液管等与细胞直接接触的物品一定要悬空不可与台面接触。
7 l# b+ `: b, {2 ~8 F$ b4 c2 D2.实验前的30min紫外消毒很有必要。
" p* [& _( H: j& |" @/ E/ k; T3.操作结束后彻底清理实验垃圾。
# q  f2 s7 N8 j4 \6 E- V- z' f& m1 t4.培养箱定期消毒(最好有一个记录本),无菌室定期清扫(除尘)。
& b% {" k5 r9 Q' Y
% }, j/ _- ~6 E. W% g8 F3 ~7 |2 H私底下还是很得意自己的细胞操作技术,染菌率在1%以下
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沙发
发表于 2010-9-9 18:05 |显示全部帖子
回复 5# anxjs
3 S) T+ @; a$ f. ~* g) M; g, h; m- O* X, ~9 M9 F

$ c2 y. J3 h* X) q, ~! G. O7 W6 ^    哈哈,其实新手也可以给很多启示滴。好多自己习以为常的习惯经常被人刨根问底地问及到原理时才发现,基础不是那么扎实——也可以弥补自己的体系漏洞

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藤椅
发表于 2010-10-22 17:10 |显示全部帖子
回复 14# bridgeyangfan
/ T. @9 V1 {( \9 n
. J- X" P; r' S8 v4 i+ }5 G& @% d2 g; _! k2 q
    不得不说,仁兄的话醍醐灌顶。
3 m: o! G7 v! `" L5 v$ ~' G! U& W我们的细胞室不含传染源类物质,所以才会显得随便一些;在做蛋白试验的时候,类似的问题我们都很注意。) L. Q3 N" U- H; p. s/ m, o
无论如何,多谢提醒
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