请教有关核移植问题，谢谢！

chiangmax

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1.核移植是将整个胎儿成纤维细胞注入去核卵母细胞，还是将供体的核注入去核卵母细胞，因为看文献时发现它是 ...$ m( w& b5 ~6 P7 h
zhaoyan1983 发表于 2010-9-14 01:07

+ c9 e" g* z" P3 {
1、核移植是将体细胞注入去核的卵膜与ZP间隙内，然后通过融合的方法；或者将体细胞直接注入去核的卵子，构成重组的卵子；
) W* Q5 i+ P3 m& K1 L9 o2、注入体细胞应当先破膜，注入时尽可能少带胞质；
8 q0 M: f. X0 Y- s* L5 A/ C) ]3、极体是乱母细胞减数分裂时排到透明带间隙内的，但是体积比较小；直接注射的方法构建NT卵子不需要去除PB1，但是融合方法必需去除，否则影响融合时手工排队。

chiangmax

4、有的时候容易把细胞碎片误认为是极体

chiangmax

核移植所需的供体细胞核是这样得到的：首先得到单个的供体细胞，然后用大约20-30微米直径的玻璃管来吸取供体 ...
% K# S# B& D& i& `; F5 bhndxws 发表于 2010-9-14 23:41

: _4 v) v) {: Z& w8 ~1 e, W$ v

' q4 y0 m" u% K0 P大侠，什么细胞啊需要这么大直径的注射针？可以并排进3个细胞了都，怎么破细胞膜啊？I服了U

chiangmax

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( U1 ]# f% _6 f- i. U( [& S没用过不代表没有，对于直径小于20微米的细胞当然要用5-12微米小点的玻璃管了。细胞直 ...# q% ?2 |/ p/ G. l
hndxws 发表于 2010-9-15 23:23

% q/ F4 Q. z) ?2 T" q8 c: J% d
请问您用的什么细胞？我做的牛、羊、猪、兔、小鼠都没有这么大的直径，您说注射针直径是30um，那么也就是说你的细胞直径起码大于30。我的理解对吧？因为你是用来破细胞膜的，起码细胞直径要大于35um以上，因为不是通过融合方式的NT.

chiangmax

有疑问就要问，王道