请大家指教这个细胞养的如何？是细胞死亡还是污染、分化？？（附图）

yxh295

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' m' d( p2 F* R- t  F我是新手，初次养人胚胎干细胞，请大家指教这个细胞养的如何？是细胞死亡还是污染、分化？？

supergama

很像以前碰到过的一种污染，但并不确定。另外细胞已经汇合了，应该早些传代了。

shewawa

我个人觉得这个细胞很不错啊。界限清楚，内部细胞团块界限不清晰，这些看起来都是优良的表现。但是和旁边的细胞距离近，估计细胞密度很高吧。应该早点进行Passage。这个可以把形态好的细胞进行挑选passage，不过你要还有很多细胞就扔了吧。

zhaoyan1983

回复 3# shewawa
  R3 j3 J8 [, e. B) K7 O5 K* ?7 g" q
3 `: q* v" ~6 r: H3 |* M: y/ o
    请教一下 像这种图片 是挑单克隆传代比较好？还是按普通的传代比较好

decloud2009

坐下慢慢看.大家继续讨论.

have-a-rest

没有污染。: {# r& B5 G# i+ c* O
细胞密度有点高了，我指干细胞。  {# w! b  K: B1 D5 [$ C
分化迹象突出，建议选择较好的克隆手工传代，逐渐会好的，密度要调低一些。) B0 g1 Z& T6 h: n- ~" K- _
密度的原则是两个克隆传代前不要长到融合。

qiongyacc

我觉得细胞状态还可以，应该早些传代，而且靠上的那个集落的右上角部分已经开始分化了，传代时剔除这部分效果会更好！+ O- E* W# k2 n7 }
祝好！

shewawa

回复 4# zhaoyan1983
# Q: N3 W3 v! p" L! X, l0 J- y% X; M" T+ I
我只看到了一个细胞啊，我觉得要是很多细胞都是形态比较好，没分化的状态是可以这样传代的，看是要是少数细胞状态比较好就应该单克隆挑选了。

cony

边缘尚还清晰，折光性还可以，致密性高，但是克隆团表面不够光滑，貌似要分化的样子，尽早传代。。

henryjia

有几点楼主没有明确：# ~. ~3 V) q8 u% ?( P$ Y0 @" r
1。是否有饲养层细胞 - 看上去是有的，细长类纤维细胞
, l) _8 }: R% Q4 W2 s2。使用的什么染色？
$ r4 S, p) D7 |* a
- u) n7 [( @; D4 H( s从形态观察可以发现：
% C" H5 U  v: J" W, {0 q; G' _9 J1。饲养层细胞老化严重，2种可能，要么饲养层细胞本身不健康；要么INACTIVATED(灭活)后培养时间太长了。5 q4 H( {' ^+ c6 q
2。一共可以看到4个HES克隆，但是11点到5点钟的3个克隆已经界限不清，出现融合。9 w# l& ?. d; H7 M3 Y0 A

% X! q3 _! p- Q+ Z- }3。还是11点到5点钟的3个克隆，很奇怪出现了类似融合或者停止生长的现象，据我的经验，往往密度太高或距离太近时，会出现细胞堆积，出现分化。这一点我有点不明白。
( M0 A/ z0 t) k7 N5 G
2 c9 O# d0 T9 W2 `综上所述，必须马上制备新鲜饲养层细胞，立即手工传代。6 H5 A. N( e3 ?$ v5 ?
& G6 s: T, y* e  f, Y/ h3 S' y
希望对你有帮助。