请大家指教这个细胞养的如何？是细胞死亡还是污染、分化？？（附图）

yxh295

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6 l! K3 `! r& c" r我是新手，初次养人胚胎干细胞，请大家指教这个细胞养的如何？是细胞死亡还是污染、分化？？

supergama

很像以前碰到过的一种污染，但并不确定。另外细胞已经汇合了，应该早些传代了。

shewawa

我个人觉得这个细胞很不错啊。界限清楚，内部细胞团块界限不清晰，这些看起来都是优良的表现。但是和旁边的细胞距离近，估计细胞密度很高吧。应该早点进行Passage。这个可以把形态好的细胞进行挑选passage，不过你要还有很多细胞就扔了吧。

zhaoyan1983

回复 3# shewawa 7 D% n1 _, M' @* n; d4 E( W

* F/ k, a, P2 v( F1 r' i0 V) _* n/ g( C- a+ q7 ^* I/ k1 v
    请教一下 像这种图片 是挑单克隆传代比较好？还是按普通的传代比较好

decloud2009

坐下慢慢看.大家继续讨论.

have-a-rest

没有污染。) s! s4 `5 j& K' E% u8 n
细胞密度有点高了，我指干细胞。# k; \& w1 _7 i2 V
分化迹象突出，建议选择较好的克隆手工传代，逐渐会好的，密度要调低一些。
- G. m/ y/ _- c- _$ e7 S密度的原则是两个克隆传代前不要长到融合。

qiongyacc

我觉得细胞状态还可以，应该早些传代，而且靠上的那个集落的右上角部分已经开始分化了，传代时剔除这部分效果会更好！
  ~- g( X- e9 p/ h9 G祝好！

shewawa

回复 4# zhaoyan1983
! K3 s" @1 F% I% B' N$ d9 j% [4 w9 C* V2 Q1 p; M
我只看到了一个细胞啊，我觉得要是很多细胞都是形态比较好，没分化的状态是可以这样传代的，看是要是少数细胞状态比较好就应该单克隆挑选了。

cony

边缘尚还清晰，折光性还可以，致密性高，但是克隆团表面不够光滑，貌似要分化的样子，尽早传代。。

henryjia

有几点楼主没有明确：
3 V+ S8 K+ s/ x# P1。是否有饲养层细胞 - 看上去是有的，细长类纤维细胞
1 Y0 V4 [+ u, M' U2。使用的什么染色？* ?' D0 y% \  e5 }7 @: t7 a; u: K

( S$ ~, n$ X3 i; a: Q7 ~. \从形态观察可以发现：
' M0 B8 H7 N. Z% s0 x; K1。饲养层细胞老化严重，2种可能，要么饲养层细胞本身不健康；要么INACTIVATED(灭活)后培养时间太长了。
3 n4 `6 X& ?# a/ n& J7 b5 k$ t2。一共可以看到4个HES克隆，但是11点到5点钟的3个克隆已经界限不清，出现融合。0 G( B* A$ q$ H$ A' {4 g9 X
1 [" {  \! k. ]: o
3。还是11点到5点钟的3个克隆，很奇怪出现了类似融合或者停止生长的现象，据我的经验，往往密度太高或距离太近时，会出现细胞堆积，出现分化。这一点我有点不明白。
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综上所述，必须马上制备新鲜饲养层细胞，立即手工传代。
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# D% H0 x- `3 U/ a! F希望对你有帮助。