关于细胞培养的一个问题

sara

有没有什么方法，又不过多的浪费培养基，又不会让细胞老化太快，也不常常传代弄得细胞很老吗？% @9 y' V, L( Y7 X
我知道鱼与熊掌不可兼得，但是这种想法有可能实现吗？
% I/ d2 H; N# k* [. H& j7 R3 b7 m谢谢大家！请前辈指点！

cc1986

建议在大瓶里面培养，接种密度不要太高，这样一代的时间更长，收货的细胞也多。
# s- u& S9 k2 i下面是个密度推荐表（仅供参考）。有文献报道，低密度接种（100cell/cm2），间充干细胞更不容易分化，还有就是80%融合前一定要消化传代，长满了消化细胞液容易老化。2 P4 L. p3 Y* u# k

chuanbaozang

适当降低培养基中血清浓度，添加一些因子以及还原性的物质，如抗坏血酸等

清影

12-Well,细胞接种密度会不会太高了，我们都是接种10000cell/well.

飞翔的十字架

回复 2# cc1986
/ q/ a- M' ]* a4 m" }9 U, s
5 r2 N& V- s6 }8 ]
; ]5 [: Q3 y! F4 X1 ]* |: |    对这个图不是很清楚，能不能解释下) L5 m5 y/ W0 g9 I( V* m3 n
如果用全骨髓贴壁，原代接种密度怎么算

bridgeyangfan

给你个网站，貌似很好：http://www.51protocol.com/cell/base/20061109/2557.html

cc1986

回复 5# 飞翔的十字架 ; V- Y4 Q' O& H9 u2 }9 O- b3 f

9 f! P6 ?8 |. f& q; p9 Q是我没说清楚，这是密度梯度离心方法的推荐密度~~目前也是刚开始用这个方法养。# D; A5 S8 C) q6 h
全骨髓我还没做过，个人对这个方法不怎么看好。分离液也不是很贵吧。

飞翔的十字架

回复 7# cc1986
1 x9 {8 z4 U+ k
1 f3 F6 N+ B3 {8 E" X6 N1 |
6 O& _, |* E' ?* Y) N. w    请问你问哪个牌子的，我用GE的，最近做不出来啊

飞翔的十字架

回复 7# cc1986
* \3 b# L# v9 Z* `. a, A* a) i1 N/ s6 E
请问你问哪个牌子的，我用GE的，最近做不出来啊

cc1986

回复 9# 飞翔的十字架
" N- p- O5 b3 C( e# t
' j" i: ]1 j# O6 ]+ A2 dPercoll 和 Ficoll我们实验室都有用，分离人的和大鼠的都可以养出来~~就是手册里面的常规操作，论坛里面也有不少讨论。