关于细胞培养的一个问题

sara

有没有什么方法，又不过多的浪费培养基，又不会让细胞老化太快，也不常常传代弄得细胞很老吗？. |1 C: }- ?- }" v0 f; ]
我知道鱼与熊掌不可兼得，但是这种想法有可能实现吗？- Y! G2 q* W+ t2 Z2 [, E, Q* M) F
谢谢大家！请前辈指点！

cc1986

建议在大瓶里面培养，接种密度不要太高，这样一代的时间更长，收货的细胞也多。0 U2 x% S, U  ]' `
下面是个密度推荐表（仅供参考）。有文献报道，低密度接种（100cell/cm2），间充干细胞更不容易分化，还有就是80%融合前一定要消化传代，长满了消化细胞液容易老化。% A5 U% L2 J' c; ^7 P  G

chuanbaozang

适当降低培养基中血清浓度，添加一些因子以及还原性的物质，如抗坏血酸等

清影

12-Well,细胞接种密度会不会太高了，我们都是接种10000cell/well.

飞翔的十字架

回复 2# cc1986
/ o% S3 z) s* G4 Y
, J4 ~: ^5 v: `" Q7 \1 _
1 T: h/ Z" G; c: P( H    对这个图不是很清楚，能不能解释下
) Q. D4 I, l: I0 o9 Z2 Z0 ?( N如果用全骨髓贴壁，原代接种密度怎么算

bridgeyangfan

给你个网站，貌似很好：http://www.51protocol.com/cell/base/20061109/2557.html

cc1986

回复 5# 飞翔的十字架
2 S' M: J/ y0 Z! ~
  H, i6 d. T: P* K- B1 p是我没说清楚，这是密度梯度离心方法的推荐密度~~目前也是刚开始用这个方法养。% I1 {- v; |1 G( L
全骨髓我还没做过，个人对这个方法不怎么看好。分离液也不是很贵吧。

飞翔的十字架

回复 7# cc1986
' k- d' P. G# d: d$ K
* [: _# C" t3 r( n1 u; L+ |2 |% J* M; n7 U3 F( C
    请问你问哪个牌子的，我用GE的，最近做不出来啊

飞翔的十字架

回复 7# cc1986 ! @" H' x9 M2 d) B0 o

- u& U* a# p, _, K; k: k请问你问哪个牌子的，我用GE的，最近做不出来啊

cc1986

回复 9# 飞翔的十字架
, B+ ^8 \6 t% |
. N3 \! L* j* l# @! w8 nPercoll 和 Ficoll我们实验室都有用，分离人的和大鼠的都可以养出来~~就是手册里面的常规操作，论坛里面也有不少讨论。