关于细胞培养的一个问题

sara

有没有什么方法，又不过多的浪费培养基，又不会让细胞老化太快，也不常常传代弄得细胞很老吗？
4 _5 |  m$ G8 B9 v+ B我知道鱼与熊掌不可兼得，但是这种想法有可能实现吗？
) J5 k+ l$ f1 e, {1 h/ q谢谢大家！请前辈指点！

cc1986

建议在大瓶里面培养，接种密度不要太高，这样一代的时间更长，收货的细胞也多。
5 W; s7 C& C2 F' B( Z下面是个密度推荐表（仅供参考）。有文献报道，低密度接种（100cell/cm2），间充干细胞更不容易分化，还有就是80%融合前一定要消化传代，长满了消化细胞液容易老化。
6 H) c, z+ z5 l# O* o7 C+ Y

chuanbaozang

适当降低培养基中血清浓度，添加一些因子以及还原性的物质，如抗坏血酸等

清影

12-Well,细胞接种密度会不会太高了，我们都是接种10000cell/well.

飞翔的十字架

回复 2# cc1986 ' t% B; F) H* @4 F% @

3 y( t+ p' M# h/ o2 e) Y( E! |( k4 F# g- \0 V  ]: K0 V
    对这个图不是很清楚，能不能解释下
6 {: L$ P! j3 G: A6 G4 H2 F9 @如果用全骨髓贴壁，原代接种密度怎么算

bridgeyangfan

给你个网站，貌似很好：http://www.51protocol.com/cell/base/20061109/2557.html

cc1986

回复 5# 飞翔的十字架 : i( P' t! q) R% i; H" {

5 o. P0 F( K% i. w" [是我没说清楚，这是密度梯度离心方法的推荐密度~~目前也是刚开始用这个方法养。$ T( p' T/ O0 E9 U
全骨髓我还没做过，个人对这个方法不怎么看好。分离液也不是很贵吧。

飞翔的十字架

回复 7# cc1986
# v( k; q+ I2 u4 H; O! a+ o- P
4 h) E# M8 r# E- T( C/ A$ e2 F% i" M8 c# Y, ?  h; `3 F
    请问你问哪个牌子的，我用GE的，最近做不出来啊

飞翔的十字架

回复 7# cc1986
# O% p1 j( \9 h! Q& y& J! I- R+ x  u5 W
请问你问哪个牌子的，我用GE的，最近做不出来啊

cc1986

回复 9# 飞翔的十字架 $ ^$ t* k$ U3 s, N3 n! }0 c

3 _9 ?  v, p: o+ kPercoll 和 Ficoll我们实验室都有用，分离人的和大鼠的都可以养出来~~就是手册里面的常规操作，论坛里面也有不少讨论。