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细胞原代培养 [复制链接]

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帅哥研究员

楼主
发表于 2010-11-5 03:01 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
细胞原代培养
$ W$ {( j  `5 z- [取所需要的组织,用平衡盐溶液冲洗干净。
, P9 _8 @  v) z剪细剪碎,铺于培养瓶或培养皿中,室温风干(时间可在2~24h 不等)。
/ G/ X7 w3 Z* F8 G* M小心加入适量培养基,使浸润组织块又不致使组织漂浮。0 p3 B$ J& k( k  v: H
4~7 天后,视观察情况换液。# m8 @( O5 k8 L& @! `, t0 t
友情提示:如若组织块较大,在剪碎过程中会产生大量胶原类粘稠物质,不利于组织风干贴块。建议可在此添加一步清洗离心的步骤。
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沙发
发表于 2010-11-5 13:52 |只看该作者
胶原类物质有什么方法可以去除又可以尽量保护细胞?

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藤椅
发表于 2010-11-8 16:24 |只看该作者
,怎么没有人回答啊!呜~

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板凳
发表于 2010-11-9 08:55 |只看该作者
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可以用DNase I来处理一下,使成团细胞或者粘稠液分散,有助于单个细胞的贴壁和生长
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报纸
发表于 2010-11-9 21:28 |只看该作者
I型胶原酶,消化1小时
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发表于 2010-11-23 21:57 |只看该作者
小鼠的胚胎干细胞原代培养,需要自己建立胚胎干细胞系,但是在从饲养层上扩增的内细胞团传一代的时候遇到了困难,感觉不是很难就是有一个问题,不能很好的消化开内细胞团细胞,本来是希望扩增,因为不能很好的消化开,每次内细胞团都是被浪费了,就是没有使细胞增多反而是减少了;还有就是就算传代了,也不能很好的生长。也看过别人养的细胞的图片,但是老是觉得自己的和他们的有区别,也不知道为什么,真是头疼啊
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发表于 2010-12-11 19:59 |只看该作者
不同的细胞应该用不同的胶原酶吧
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发表于 2010-12-11 20:00 |只看该作者
不同的细胞应该用不同的胶原酶吧

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发表于 2011-7-19 23:37 |只看该作者
xiaoma402716390 发表于 2010-11-5 03:01 ( U: ~# o# }7 h  `; H
细胞原代培养
. e! l: q9 L+ |( {- V7 r5 A% C- e0 G取所需要的组织,用平衡盐溶液冲洗干净。
7 `1 f7 \* q: ^* Z3 @( _  i剪细剪碎,铺于培养瓶或培养皿中,室温风干(时间 ...

1 r( S# R1 O; X! x请问“一步清洗离心”的步骤是怎样的?
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发表于 2011-7-23 09:13 |只看该作者
我没风干过,想试试,请问风干的原因是什么啊?贴壁得好些吗??
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