干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
中源协和

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
楼主: 清影
go

脐带的分离遇到难题   [复制链接]

Rank: 3Rank: 3

积分
414 
威望
414  
包包
1783  

优秀会员 金话筒 美女研究员 热心会员

楼主
发表于 2010-11-5 09:39 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
干细胞之家微信公众号
脐带用胰酶消化后过筛很粘稠,什么原因?怎么处理啊?单纯稀释可以么?有没有更好的办法?
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
414 
威望
414  
包包
1783  

优秀会员 金话筒 美女研究员 热心会员

沙发
发表于 2010-11-5 13:29 |显示全部帖子
0.05%胰酶消化1h(大概每1cm加消化液3-4ml),0.1%胶原酶2消化1h.我刚开始摸索条件,不知道合适不?请指点~~
; q4 T, J7 s8 I& z6 P- h5 C" _筛子用的是150目的,大小感觉可以了。
1 ]( ]- e' y8 b$ b6 a$ ?咨询了一些人,说法不一,有的说是因为DNA缠绕在一起了,所以我加了DNA裂解酶,效果不是很好;有的说是胶原蛋白的原因,不知道用什么方法可以去除,二硫苏糖醇可以么?
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
414 
威望
414  
包包
1783  

优秀会员 金话筒 美女研究员 热心会员

藤椅
发表于 2010-11-5 13:32 |显示全部帖子
因为很粘稠,所以分散可能受限,加入了一步离心,效果也不太好

Rank: 3Rank: 3

积分
414 
威望
414  
包包
1783  

优秀会员 金话筒 美女研究员 热心会员

板凳
发表于 2010-11-8 16:20 |显示全部帖子
谢谢柏林小杨。,大家要帮帮我哦

Rank: 3Rank: 3

积分
414 
威望
414  
包包
1783  

优秀会员 金话筒 美女研究员 热心会员

报纸
发表于 2010-11-16 09:14 |显示全部帖子
没有人回应哦~~呜
9 ~: S- }' j0 J/ D+ T& s有好的解决方法要分享一下哈

Rank: 3Rank: 3

积分
414 
威望
414  
包包
1783  

优秀会员 金话筒 美女研究员 热心会员

地板
发表于 2010-11-29 09:37 |显示全部帖子
,谢谢楼上的同胞们。/ p; Z% K5 L0 B& @
目前我们已经找到了一些解决途径,使用DAase,HAase,DTT等,效果还不错。单纯的增加稀释,对细胞损失确实很大。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
414 
威望
414  
包包
1783  

优秀会员 金话筒 美女研究员 热心会员

7
发表于 2010-12-9 17:01 |显示全部帖子
请问楼上你们是离心洗涤么?转速多少?上清倒掉时会损失很多细胞
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 5   查看全部评分

‹ 上一主题|下一主题
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2026-7-1 23:41

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.