关于原代培养

kogguli

我做大鼠肾小球系膜细胞的原代培养，一个月了也没有长满一瓶，生长很慢求指点

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把你的培养方法描述一下，还有你的换液时间，培养基的种类以及取的方法等介绍一下，这样大家才能帮你找到原因，你这样说太过于抽象了！

manybit

分析：（1）细胞消化下来了多少？（2）换液情况如何？一般2-3天换一次液

kogguli

我是这样做的，取出大鼠双肾，然后把皮质部分减下来，在150目钢筛上研磨，取滤液，然后把滤液过200目刚筛，取筛上，然后用胶原酶消化半小时后接种。培养的肾小球不是直接培养的细胞，大概三天吧细胞爬出来，但是一直长不满一瓶，因为培养基的夜色不怎么改变，所以换夜不勤，大概四五天吧，看文献这么做的，自己做的不太理想，求高手指教，感恩节之际，谢谢大家

kogguli

回复 3# manybit , r" J. o' S! f" e

% K7 p: Y, ~/ ^! ~+ Y: g我是这样做的，取出大鼠双肾，然后把皮质部分减下来，在150目钢筛上研磨，取滤液，然后把滤液过200目刚筛，取筛上，然后用胶原酶消化半小时后接种。培养的肾小球不是直接培养的细胞，大概三天吧细胞爬出来，但是一直长不满一瓶，因为培养基的夜色不怎么改变，所以换夜不勤，大概四五天吧，看文献这么做的，自己做的不太理想，求高手指教，感恩节之际，谢谢大家
- h. V7 M& ~5 M. b本文来自干细胞之家  - 中国干细胞研究员的交流论坛，http://www.stemcell8.cn，详情请看：http://www.stemcell8.cn/thread-30409-1-1.html

痞子的烟头

原代培养，一定要及时传代及换液，哪怕如你所说，细胞长的不满或状态不好，不然一直这样放着，细胞只会越来越少，最终死亡，怕密度小，可以接种在小的DISH中，还有血清浓度要合适

kogguli

回复 6# 痞子的烟头
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    这样说的话就是即使培养液的颜色不怎么变也要两三天换一次，是不是长得不太慢也可以考虑消化下来传代，我感觉就是那个密度不怎么长了，但是不如文献上的照片那么密集